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菊花(Chrysanthemum morflorium Ramat.)作为我国十大传统名花和世界范围内的四大切花之一,深受世界各地人们的喜爱和推崇,具有极高的观赏价值和经济价值。大多数菊花品种属于典型的短日照植物,需要在日照长度变短的秋季才能开花。菊花的花期作为生产和观赏的重要性状也会直接影响其上市时间和价格。BBXs家族转录因子是一类较大的锌指转录因子家族,是植物生长和发育过程调控网络的关键调控因子,参与植物幼苗光形态的建成,开花的光周期调控,生物胁迫和非生物胁迫等过程。本研究从菊花‘神马’中克隆得到两个BBXs转录因子,并进一步对两个转录因子进行了功能分析,主要内容及结论如下:1.基于酵母双杂筛库的结果得到与CmBBX24可能互作的蛋白片段,结合RACE-PCR技术从菊花‘神马’中克隆得到一个BBX转录因子的全长序列,多序列同源比对和进化树分析后,将其命名为CmBBX29。酵母单杂交实验结果显示CmBBX29不具有转录激活活性。亚细胞定位结果表明CmBBX29具有核定位信号。2.组织定量结果显示CmBBX29基因在菊花的各个组织中均有表达,其中在根中表达量最高,花和叶中其次,茎中表达量最低。在48h内的节律表达结果显示,CmBBX29和CmCO在LD和SD条件下均响应节律变化,且变化趋势类似,表明菊花CmBBX29基因可能参与光周期调控植物开花的过程。此外,胁迫处理的定量结果表明,干旱和ABA诱导CmBBX29的表达。3.将CmBBX29超表达转化拟南芥,在长日照条件下,转基因拟南芥的开花时间明显推迟,对调控开花的关键基因定量分析,结果显示,开花促进基因FT、SOC1、LFY和AP1的表达明显下调,而开花抑制基因FLC的表达显著上调。4.对转基因拟南芥进行干旱处理后发现,超表达CmBBX29显著提高了转基因拟南芥的耐旱性。另外,不同浓度ABA处理拟南芥种子,结果显示超表达CmBBX29转基因拟南芥种子对ABA更敏感。5.基于酵母双杂筛库的结果,从菊花‘神马’中克隆得到另一个BBX转录因子的全长序列,多序列比对以及进化树分析结果显示,该基因编码的蛋白也有一个单独的B-box结构域,且与拟南芥AtBBX28同源性较高,因此将其命名为CmBBX28.1。6.组织特异性的定量结果显示CmBBX28.1在根中表达量最高,茎、叶中其次,在花中表达量最低。节律表达模式结果显示,CmBBX28.1表达水平响应节律变化,且转录水平变化趋势与CmBBX29,CmCO类似。酵母中转录激活实验表明,CmBBX28.1不具有转录激活活性。洋葱和烟草的亚细胞定位结果显示,CmBBX28.1具有明显的核定位信号。7.为了进一步探究CmBBX29、CmBBX28.1与CmBBX24间的互作情况我们分别利用酵母双杂交、双分子荧光互补实验进行了验证,实验结果表明CmBBX29、CmBBX28.1与CmBBX24均可以在蛋白水平上互作。