金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae是国内外广泛应用的一种重要的虫生真菌,寄主范围广泛,可有效防控200多种昆虫。东亚飞蝗是我国一种重要的农牧害虫,金龟子绿僵菌对东亚飞蝗有着较高的毒力。关于绿僵菌侵染蝗虫的机理,体壁侵染途径研究的较为透彻,而关于绿僵菌能否通过消化道侵染,存在争议。本研究拟通过绿僵菌饵剂饲喂东亚飞蝗,应用透射电镜观察中肠显微结构病理变化,测定分析中肠生化酶活性变化情况,阐明绿僵菌通过中肠侵染东亚飞蝗的机理。本研究取得的主要成果如下:(1)通过农杆菌介导转化的方法,获得含100个转化子的绿僵菌IMI330189突变体库,对其中12株绿僵菌胞外蛋白酶(酸性、中性、碱性)、几丁质酶、磷脂酶进行了酶活测定,发现绿僵菌胞外蛋白酶活力与毒力显著正相关。(2)饲喂绿僵菌IPPM202的饵剂可对东亚飞蝗中肠微绒毛、细胞核、线粒体、内质网产生破坏,并且随着侵染时间的推移,各组织细胞器病变情况加剧。表现为微绒毛严重脱落,细胞核内染色质不均匀、降解,线粒体数量减少、降解形成空泡,内质排列无序、断裂等现象。(3)绿僵菌IPPM202侵染东亚飞蝗后,中肠保护酶(SOD、POD、CAT、PO)和解毒酶(ACh E、ESTs)呈现不同的变化趋势,但总体上是先升高后降低。酶活的变化反映了绿僵菌和东亚飞蝗之间存在相互竞争,和绿僵菌的致病机理有一定相关性。