62份白三叶草种质资源遗传多样性初步研究与评价

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白三叶草(Trifolium repens L)为豆科三叶草属多年生草本植物。原产于欧洲,广泛分布于温带及亚热带高海拔地区,是目前世界上分布最广泛的豆科牧草之一。我国云南、贵州、四川、湖南、湖北、新疆等地都有野生分布,长江以南各省均有大面积种植。白三叶草茎叶柔嫩,营养丰富,适口性好,耐践踏,是温带地区多年生混播草地不可缺少的优质牧草。此外,白三叶草在很强的抗逆性和适应性,耐瘠薄,还可作为水土保持和城市及庭院绿化植物,生态价值较高。亦可作绿肥,改良土坡,培肥地力。我国虽有丰富的白三叶草资源,但是,由于相关的研究报道很少,严重地制约了对白三叶草的合理利用和开发。本研究收集了国内外共62份白三叶草种质资源,从形态学、抗热性评价和等化酶三个方面进行遗传多样性评价,目的在于了解62份白三叶草种质资源遗传背景与遗传多样性状况,为白三叶草在种质资源的评价、利用开发、品种选育等方面提供基础数据。1.对白三叶草形态多样性分析鉴定的结果显示,62份白三叶草种质资源在15个重要形态学性状指标上表现出较大的差异,变异系数从14.32%~76.51%。因子分析表明,前五个主成分占了76.299%的变异,可以概括出大部分的变异。依据前五个因子的得分系数和因子旋转后各性状在坐标系中的位置,我们把这三个因子分别命名为叶型因子、植株因子、匍匐茎因子。2.根据各材料间欧氏距离,利用SPSS16.0分析软件对15个形态学性状聚类分析表明,62份白三叶种质资源主要分为3大类。第一大类的11份种质材料花色全部为粉红色,属于中间类型。第二大类有21份种质材料,这些材料花色均为白色,综合表现为植株明显高大,叶面积也较大,花序数明显增多,匍匐茎发达。这类种质材料具有高产的潜力,可作为高产牧草选育与人工草地建植的首先材料。第三大类有29份种质材料,这些材料花色也均为白色,综合表现为植株比较低矮,叶面积较小,花序数明显减少。这类种质材料中有些具备草坪草的特性,可作为草坪草选育或利用的首先材料。3.对8份白三叶草种质资源进行抗热性分析的结果表明,在人工模拟高温胁迫下,随着温度上升,白三叶草叶片相对含水量下降、细胞膜相对透性增大、叶片脯氨酸含量升高和叶片叶绿素含量降低。这些变化都呈有一定的规律性,而且各材料之间变化有差异。采用五级评分法对8份白三叶草种质材料进行抗热性综合评价,最后分析得出抗热性能强弱的排序是那努克>云南镇雄>新疆南山>武昌>黔晴>瑞文德>海法>吉林白河。那努克、云南镇雄、新疆南山、武昌都是抗热性较强的种质材料,可作为耐热品种利用或选育的首选材料。4.采用酯酶、过氧化物酶对62份白三叶草种质资源遗传多样性进行检测,谱带分析表明,两种酶共检测到5个等位基因位点,其中3个位点为多态位点。两种等位酶5个基因位点平均每个位点等位基因数A的平均值为1.6847;平均每个位点等位基因的有效数目Ae的平均值为1.3737;多态位点的百分数P的平均值为70.0%;平均每个位点实际杂合度Ho的平均值为0.5366;平均每个位点预期杂和度He的平均值为0.4098,显示了较高的多态性。5.根据白三叶草种质资源遗传相似度,利用NTSYS生物统计软件采用UPGMA法进行聚类分析结果表明,62份白三叶草种质资源主要可以分为三大类。分类的结果与地理区域有一定的相关性。与形态学性状聚类分析结果有一定差异。这可能是两种研究的方法、水平及所依据的原理各不相同引起的。研究结果表明:白三叶草具有丰富的遗传多样性,是优良的种质资源。
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