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多花白澳山龙眼(Leucadendron floridum R.Br.)是山龙眼科(Proteaceae)银叶树属(Leucadendron)的一种常绿灌木,是一类较新的切花及园林观赏植物资源,主要分布于非洲南部及澳大利亚南部,西南林学院在948项目的资助下引进了本种的种子。本文对多花白澳山龙眼组织培养中的无菌发芽、增殖培养、幼芽伸长生长、根诱导、栽培技术等进行了研究。在试验过程中,取得了一些阶段性成果,为进一步研究奠定了基础。研究的具体结果如下:
1 无菌发芽
多花白澳山龙眼种子无菌发芽试验中,其最高的发芽率仅为56%,比国外相同试验条件下所得的数据低,仍需改进方法。种子在固体培养基上的发芽率比在液体培养基上(纸桥为载体)高6%,液体培养基在发芽时间上较固体培养基短,变温培养可以较好的提高种子发芽率。采用A+B+C(加0.5%吐温-80)组合,即75%的酒精处理1分钟、3%的次氯酸钠处理15分钟、0.1%升汞(加0.5%吐温-80)处理12分钟,可以较好的降低污染率。
2 组织培养
在组织培养过程中得出以下结论: (1)1/2MS为比较适合多花白澳山龙眼继代培养的基本培养基。(2)6-BA和NAA为比较适合多花白澳山龙眼增殖培养的细胞分裂素和生长素。(3)在进行丛芽增殖培养正交试验后得出以1/2MS为基本培养基向其中添加6-BA1.0 mg/L、NAA0.01 mg/L、B9 15 mg/L、蔗糖20g/L有利于丛芽增殖。向其中添加6-BA1.5 mg/L、NAA0.01mg/L、B9 5mg/L、蔗糖20g/L 则有利于芽苗的伸长生长。(4)愈伤组织增殖培养试验较合适的配方为1/2MS+NAA2.0mg/L+6-BA 0.1me/L+蔗糖20g/L。(5)愈伤组织诱导不定芽较好的培养基为1/2MS+6-BA1.5 mg/L+NAA0.05 mg/L+蔗糖20g/L。(6)pH值为5.8时是最适合多花白澳山龙眼组织培养的pH值。(7)20g/L的蔗糖更加适合多花白澳山龙眼的继代培养。(8)40天应为多花白澳山龙眼比较合适的继代培养周期。(9)添加5mg/L的抗坏血酸可以起到抑制多花白澳山龙眼无菌苗褐化的作用,通过添加适当浓度(0.3%)的活性碳、适当提高琼脂的浓度(7g/L)可以起到缓解玻璃化的作用。(10)以1/2MS+6-BA0.05mg/L+NAA0.2mg/L+土豆汁40%+蔗糖30g/L的培养基可作为较理想的壮苗培养基。(11)以1/2(MS改),不添加任何激素,添加30g/L,的蔗糖的培养基可作为理想的生根培养基。
3 栽培技术
在进行多花白澳山龙眼的栽培技术研究过程中发现,以较高浓度的赤霉素(GA3)浸泡24h的处理方法有助于提高多花白澳山龙眼种子发芽率,但仍旧偏低,需进一步改进方法。在基质(腐殖土:珍珠岩:沙=2:1:1)上栽培,多花白澳山龙眼的长势较好。根据为期一年的观测,多花白澳山龙眼在昆明一年中有两个明显的生长高峰期,分别为2-3月和6-9月。