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背景及目的我们前期研究表明:瞬时受体电位通道（Transient receptor potential channels,TRPs）家族成员TRPP2和TRPV4在人脐静脉内皮细胞（Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）可以形成天然的功能性通道复合体,且作为机械感受蛋白感应剪切力的变化,通过介导Ca2+内流,继而影响NO生成,参与血压的调节。在血压的调节过程中,阻力血管发挥着非常重要的作用。所以,本实验旨在验证大鼠肠系膜动脉内皮细胞（Mesenteric arteries endothelial cells,MAECs）是否存在天然的TRPP2/TRPV4功能性通道复合体,并且探索在盐敏感性高血压大鼠的阻力血管上该通道复合体的活性将会发生何种变化,同时探讨其调节机制。方法采用酶消化法分离培养原代大鼠MAECs,并应用内皮特异性标记物CD31进行鉴定;采用免疫荧光和免疫共沉淀的方法验证TRPP2和TRPV4在MAECs形成通道复合体;采用内膜向外式（Inside-out）膜片钳技术检测TRPP2/TRPV4通道复合体的电生理特性。雄性盐敏感（Salt-sensitive,SS）大鼠和盐抵抗（Salt-resistant,SR）大鼠,分别喂饲正常盐（0.3%NaCl）或高盐（8%NaCl）饲料21天;采用尾套法测定大鼠血压;采用血管开放式膜片钳记录方式检测原位大鼠肠系膜动脉内皮TRPP2/TRPV4通道复合体活性,通过比较不同组别的通道开放频率（NPo）在体内水平评价血管内皮TRPP2/TRPV4通道复合体活性的变化。采用内膜向外式膜片钳观察外源性醛固酮对原代大鼠MAECs上TRPP2/TRPV4通道复合体活性的影响;采用DAF-FM和Fluo-3荧光探针分别检测醛固酮对MAECs的Ca2+和NO水平的影响;采用内膜向外式膜片钳检测NO是否调节TRPP2/TRPV4通道活性。结果TRPP2和TRPV4在MAECs上形成一个单通道电导为21.7-pS的通道复合体;SS大鼠的基础血压高于SR大鼠（132±5 vs.118±5 mm Hg,p<0.05）;高盐摄入21天后,SS大鼠的血压升高约36 mm Hg。SR大鼠高盐饲养21天后,血压与正常盐组比较没有显著升高;喂饲高盐的SS大鼠,原位肠系膜动脉内皮细胞上的TRPP2/TRPV4通道复合体的活性显著低于喂饲正常盐的SS大鼠（NPo:0.34±0.04 vs.0.16±0.01,p<0.01）,而喂饲高盐的SR大鼠中却没有发生明显变化（NPo:0.36±0.03 vs.0.35±0.03）。膜片钳结果显示:100 nmol/L醛固酮作用于MAECs 10 min,对MAECs上的TRPP2/TRPV4通道复合体活性并没有影响,而当醛固酮较长时间（24 h）作用于细胞后,TRPP2/TRPV4通道电流的活性却发生下降,且该作用可被盐皮质激素受体拮抗剂（Eplererone）所逆转。激光共聚焦显微镜结果表明:随着醛固酮作用于细胞时间的延长,MAECs产生NO的能力下降,并且该过程可能是由于醛固酮导致Ca2+内流降低而引发的,醛固酮对[NO]i、[Ca2+]i的抑制作用均可被Eplererone（10μmol/L）所缓解。另外,膜片钳结果证明:NO供体（SNP）可升高MAECs上的TRPP2/TRPV4通道复合体（NPo:0.89±0.05 vs.0.37±0.02,p<0.01）的NPo,在NO清除剂（Carboxy PTIO）存在的条件下,SNP不能升高TRPP2/TRPV4通道的活性。醛固酮孵育MAECs 24 h后加入SNP,SNP能够逆转醛固酮导致的TRPP2/TRPV4通道活性下降。结论血管内皮细胞TRPP2/TRPV4通道复合体活性降低可能是盐敏感性高血压大鼠血管内皮功能障碍的机制之一;并且该通道复合体的活性受醛固酮和NO调节。