背景与目的雌激素参与调节大量的生物学过程,传统的雌激素效应是作为转录因子通过ERα, ERβ和雌激素受体相关蛋白γ发挥作用。不同于传统的雌激素核受体,新的雌激素膜受体GPR30则通过细胞内第二信使途径发挥效应,同时与抗雌激素表现出明显的亲和力。研究表明GPR30参与了细胞增殖、周期以及凋亡的调节。作为激素敏感组织之一,雌激素不仅促进乳腺的发育,而且刺激乳腺癌的生长。那么这一新的雌激素受体在乳腺癌中发挥什么作用呢?为此,本研究以乳腺癌细胞SKBR3为研究对象,以干扰GPR30的表达为手段,分析GPR30表达与肿瘤细胞生长的相关性。方法运用siRNA干扰SKBR3细胞中GPR30的表达,给予17β-E2、EGF、SB202190干扰细胞生长,运用半定量RT-PCR检测各处理组GPR30 mRNA的表达水平,以MTT法检测干扰GPR30表达后细胞生长的变化。结果1.成功构建了2个重组质粒pshRNAGPR301和pshRNAGPR302,并应用GenEscortTMⅠ成功转染至乳腺癌细胞株SKBR3,RT-PCR结果显示GPR30基因在mRNA水平被显著抑制,其表达率分别为正常细胞的64.25 %和54.24 %。2.使用17β-E2、EGF、SB202190干扰细胞生长,1小时和24小时半定量RT-PCR检测GPR30表达,结果显示各组GPR30表达无差异;使用MTT检测细胞生长,结果显示:17β-E2对细胞生长无影响,EGF发挥了促生长作用,而SB202190抑制了细胞生长,且上述作用在抑制GPR30表达前后的细胞中无明显差异性。结论GPR30的表达与乳腺癌细胞生长之间未见明显相关性。