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目的:胰腺癌起病较隐匿、恶性程度较高,80%的胰腺癌患者疾病发现时已经失去了手术机会且胰腺癌的患者对放化疗治疗不敏感,从而使得全世界内胰腺癌一直处于较高的死亡率。现代生物科技的进步使得其他恶性实体肿瘤的治疗突飞猛进。通过临床收集本地区胰腺癌患者的临床及病理信息,分析总结影响临床预后的因素。通过高通量测序检测胰腺癌患者高低频的基因突变情况,进一步说明本地区胰腺癌患者基因突变谱。综合分析TGF-β信号通路中SMAD4等基因突变对生存的影响,探讨SMAD4基因突变对胰腺癌发病的可能作用及其临床意义,为进一步寻找与发现胰腺癌的靶向治疗提供理论依据。方法:1、收集2016年7月1日-2020年3月31日,天津医科大学总医院由2位经验丰富的病理科医生各自阅片确认为胰腺导管腺癌35例,其中行根治性胰腺恶性肿瘤手术切除术25例成对留取肿瘤组织及癌旁组织,行保守性胰腺癌手术10例,成对留取穿刺组织及5ml外周静脉血液。所有患者进行基因检测前均未采用过放化疗及靶向等抗肿瘤治疗,各患者的临床资料、病理情况、生存资料完整。2、高通量基因检测胰腺癌患者基因突变情况:a.临床组织样本进行病理的取材、脱水、包埋、切片及苏木素-伊红染色制备切片;b.对肿瘤组织及其对应样本进行DNA抽提;c.构建文库;d.使用Illumina平台进行测序。3、采用SPSS 22.0统计软件进行统计分析,取α=0.05为检验水准。正态分布的连续性变量采用(±s)描述,非正态分布的连续性资料采用中位数描述。生存分析采用Kaplan-Meier法,率的比较采用χ~2检验,单因素分析采用Log-rank检验。4、对db SNP及COSMIC数据库中TGF-β信号通路关键突变基因的临床意义进行注释。结果:1.一般临床特征在35例胰腺癌患者中男:女=2:1,大多数患者在60岁以上发病,多数男性患者具有吸烟史,过半患者初始临床症状是腹痛,多数患者临床发病即为中晚期,过半患者存在体重减轻,胰头癌多数具有梗阻性黄疸,多数患者CA19-9水平是升高的,多数患者随机空腹血糖是升高的。2.胰腺癌患者基因突变情况35例胰腺癌患者中最常见的基因突变是KRAS(91.4%)、TP53(71.4%)、SMAD4(22.9%)、CDKN2A(20%)、CREBBP(8.6%)、RNF43(8.6%)、BRAF(8.6%)等。3.TGF-β信号通路中关键基因的突变情况具有TGF-β信号通路相关基因突变的患者有11名(31.4%),SMAD4基因突变8种,SMAD3基因突变1种,TGFBR1基因突变2种,TGFBR2基因突变2种,在SMAD4基因突变中有5种为内含子突变导致的剪切突变,3种为错义突变。4.生存分析SMAD4基因突变组中位生存时间5.0月,无SMAD4基因突变组中位生存时间17.0月,差异有统计学意义(P=0.029);入院前体重下降患者中位生存时间8.0月,入院前体重未下降患者中位生存时间31.0月,差异有统计学意义(χ~2=7.6,P=0.006);临床分期晚(AJCC分期为Ⅲ、Ⅳ期)的患者中位生存时间9.0月,临床分期早(AJCC分期为Ⅰ、Ⅱ期)的患者中位生存时间24.3月,差异有统计学意义(χ~2=7.5,P=0.006)。结论:1.临床结论:现今胰腺癌患者发病时一般症状体征不明显不特异、临床分期较晚,临床分期较晚,从而使胰腺癌的治疗效果仍处于窘境。2.全部基因分析结论:胰腺癌是以高频突变的KRAS、TP53、SMAD4、CDKN2A为主,同时具有大量低频突变,如BRCA1、ATM、ALB1等。3.TGF-β信号通路结论具有TGF-β信号通路中SMAD4基因突变的患者的临床预后相较于无基因突变的患者预后更差,突变基因个数较多的患者预后相对更差。4.生存分析结论术前体重下降、肿瘤临床分期晚、具有SMAD4基因突变的患者具有相对更差的临床预后,而未发现吸烟史、糖尿病史、肿瘤位置、术前黄疸、是否行根治性手术与生存有明显的关系。