【摘 要】
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目的：采用酶消化法体外培养出纯净的人神经母细胞瘤细胞系，用神经特异烯醇化酶染色、软琼脂克隆形成实验来进一步鉴定细胞，为下一步的实验做好细胞的准备工作。 方法：无菌条件
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目的：采用酶消化法体外培养出纯净的人神经母细胞瘤细胞系，用神经特异烯醇化酶染色、软琼脂克隆形成实验来进一步鉴定细胞，为下一步的实验做好细胞的准备工作。 方法：无菌条件下，取本院住院手术的神经母细胞瘤病人的新鲜标本．选取肿瘤未坏死部分，放入盛有DMEM培养液的无菌瓶内，瓶周围放置冰块，迅速送至细胞净化培养室。通过消化培养法培养细胞，将神经母细胞瘤细胞放入DMEM培养液，补加10％胎牛血清及青、链霉素，置于37℃、5％CO2、100％湿度的二氧化碳培养箱内培养；将培养的细胞通过机械刮除法和选择性酶消化法进行分离与纯化，建立细胞系，作为细胞模型。采用细胞形态学、NSE免疫组化染色、软琼脂单克隆形成实验对所培养细胞进行检测鉴定。 结果：消化培养方法效果好，当天即可见从肿瘤标本上消化下来的细胞，全部为小圆形细胞，第2天即可见细胞的形态变化，成小梭形。分离纯化后的肿瘤细胞形态基本一致，成一端或两端胞浆突起的短梭形细胞，NB细胞呈小梭形，部分呈泪滴状，少数呈三角形，这种为幼稚型细胞。有些细胞胞浆突起延长，被视为成熟型细胞。NSE染色及软琼脂克隆形成实验结果证实所培养细胞为神经母细胞瘤细胞。 结论：本实验用酶消化法将NB肿瘤病人的新鲜肿瘤标本建成了神经母细胞瘤细胞系。
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