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本文由三部分构成，一是对采集的可疑病料进行接触传染性脓疱皮炎病毒（CPDV）的分离和鉴定，为 CPD 的病原学诊断奠定基础。二是建立 CPDV 的 PCR 检测方法，加快了检测速度，提高了检测的特异性。三是采用PCR技术克隆出CPDV疫苗株（CPDVy），甘肃(CPDV1)、陕西(CPDV2)和山东(CPDV3)分离株的 B2L 基因，对其核苷酸序列的同源性进行比较及分析，绘制了系统进化树，以期了解 CPDV 疫苗株和流行株主要保护性抗原 B2L 基因的同源情况，为 CPDV 的防制提供分子流行病学资料。主要试验和结果如下： 1.以临床采集的病羊痂皮为材料，采用原代犊牛睾丸细胞培养、磷钨酸负染、细胞超薄切片技术和动物接种试验，进行病毒的分离和鉴定。结果表明，所采集的 17 份病羊痂皮中，有 11 份病料在犊牛睾丸细胞的连续 8 代以上培养中，出现规律的 CPE；在用病料上清或细胞培养物进行磷钨酸负染的电镜检查中，可见到典型的副痘病毒粒子；细胞超薄切片中也可见到不同时期的病毒粒子形态；羔羊划痕接种后出现与自然病例完全相同的水泡和脓疱。这些结果均证明本试验中对病毒的分离鉴定是成功的。 2.参照已发表的 CPDV NZ-2 株的基因序列，设计一对特异性引物，以 CPDV 疫苗株（CPDVy）细胞培养毒为模板，建立 CPDV 的 PCR 检测方法。结果表明，PCR 对 CPDV的检测与细胞培养中的 CPE、电镜检测的结果相一致。对扩增产物进行序列分析，表明与 NZ-2 株的核苷酸同源性高达 97%。用此方法对口蹄疫病毒、蓝舌病病毒和羊痘病毒进行扩增，结果均为阴性。此方法对 17 份病料的扩增结果与病毒的分离鉴定结果相一致。建立的 PCR 方法用于 CPDV 的检测是可行的、快速的、特异的。 3.参照已发表的 CPDV NZ-2 株的 B2L 基因序列，利用 PCR 技术扩增出疫苗株、甘肃、陕西和山东的分离株 B2L 基因，将其分别克隆于 pMD-18T 载体并进行核苷酸序列测定，应用 DNAStar 软件对国内 4 株 CPDV 和 NZ-2 株序列进行同源性比较，并进行了进化树分析。结果表明，国内 4 株 CPDV 核苷酸序列与 NZ-2 株序列相比，国内的 4 株均在 1111 处有一碱基缺失；疫苗株 CPDVy 与甘肃的 CPDV1 株、陕西的 CPDV2 株和山东的 CPDV3 株的核苷酸同源性分别为 99.7%，96.9%和 97.4%，与 NZ-2 株的同源性为96.7%；国内 CPDV 株与 NZ-2 株的氨基酸序列同源性为 92.0%～96.0%，此结果说明流行毒株和疫苗株 B2L 基因较保守，变异幅度较小，抗原变化不显著。 在国内首次建立了 CPDV 的 PCR 检测方法，首次报道了国内分离株及疫苗株 B2L基因核苷酸序列，并对其进行了同源性分析。