羊奶和牛奶中含有丰富的脂肪、蛋白质、矿物质等营养物质,其种类和含量有一定的差异。羊奶中的营养物质含量较高而且致敏性低、产量低,导致其市场价值也远远高于牛奶。但是二者的物理性质比较接近,仅凭感官很难将二者区分。羊奶和牛奶中的蛋白质都是由酪蛋白和乳清蛋白组成的。酪蛋白主要包括α-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白,乳清蛋白包括α-乳白蛋白和β-乳球蛋白、乳铁蛋白和免疫球蛋白等。虽然牛奶和羊奶中均含有这些蛋白质,但是其含量存在一定的差异,即羊奶中的α-酪蛋白远远低于牛奶中的α-酪蛋白。更关键的是牛奶和羊奶的各类蛋白质分子结构之间也存在差异,这种差异可以被单克隆抗体特异性识别,而这是基于抗原抗体特异性反应的原则,建立ELISA方法检测牛α-酪蛋白和牛β-乳球蛋白的依据。因此,本研究以牛α-酪蛋白和牛β-乳球蛋白作为抗原,采用单克隆抗体制备技术、抗体纯化技术等制备抗体,从而建立了间接ELISA技术以检测羊奶及羊奶粉中的牛奶、牛乳清粉成分及其含量。本研究取得如下结果:（1）牛α-酪蛋白浓度在10μg/m L时于4℃过夜包被,一抗和二抗稀释度分别为1:1000、1:5000,且孵育时间为45 min时,是间接ELISA方法检测牛α-酪蛋白的最佳反应条件。（2）获得了纯化的牛α-酪蛋白单克隆抗体,浓度为0.986 mg/m L,抗体效价为5?105。（3）以牛α-酪蛋白单克隆抗体为检测抗体,按照间接ELISA方法的步骤,建立了牛α-酪蛋白的检测标准曲线,检测羊奶中牛奶含量、羊奶粉中牛奶粉含量的标准曲线。（4）牛β-乳球蛋白浓度为10μg/m L时4℃过夜包被,一抗和二抗稀释度分别为1:1000、1:5000,孵育时间为45 min时,为间接ELISA方法检测牛β-乳球蛋白的最佳反应条件。（5）获得了一株能够分泌特异性识别牛β-乳球蛋白单抗的杂交瘤细胞株5-D11,抗体亚型为Ig G2b型,轻链为κ型。纯化后的牛β-乳球蛋白抗体,浓度为0.909 mg/m L,抗体效价为5?105。（6）以牛β-乳球蛋白单克隆抗体为检测抗体,按照间接ELISA检测步骤,建立了牛β-乳球蛋白的检测标准曲线,检测羊奶粉中的牛乳清粉含量的检测标准曲线。本研究成功制备了牛α-酪蛋白及牛β-乳球蛋白的单克隆抗体,并根据间接ELISA技术建立了羊奶中掺入牛奶、羊奶粉中掺入牛奶粉、牛乳清粉的定量检测方法,对羊奶、牛奶及奶制品的掺假及鉴别检测具有重要的价值。