第一部分目的探讨淋巴结转移率(lymph node ratio, LNR)是否能更优于淋巴结转移数(positive lymph nodes, PLN)用于评价乳腺癌术后患者的复发风险和总生存时间以及LNR联合人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor-2, HER-2)表达状态评价乳腺癌预后风险的可行性。方法回顾性分析天津医科大学附属肿瘤医院2002～2005年行腋下淋巴结清扫术且术后经病理证实淋巴结转移阳性、至少有5年完整随访资料的原发性浸润性乳腺癌患者临床病理资料1095例,采用单因素、多因素分析方法,比较分析PLN与LNR对乳腺癌术后患者无复发生存(replase free survival, RFS)、总生存(overall survival, OS)的影响；采用Log-rank检验比较不同LNR分组患者的生存差异,并据此确定LNR的最佳分组界值；分析比较PLN联合HER-2表达状态所界定的风险分组(PLN风险分类)及LNR联合HER-2表达状态所界定的风险分组(LNR风险分类)患者的生存差异。结果1.单因素生存分析,肿瘤大小分期,组织学分级、ER/PR/HER-2状态、PLN、LNR、切检淋巴结总数、结外软组织侵犯、辅助化疗及内分泌治疗与患者RFS、OS均具有明显的相关性(P<0.05)。2.多因素生存分析,当PLN和LNR作为协变量分别进入COX比例风险模型时,PLN和LNR均为患者RFS和OS的独立预测指标(P<0.001)；当PLN和LNR作为协变量同时进入COX比例风险模型时,LNR依然是患者RFS和OS的独立预测指标(RFS:P<0.001, OS:P=0.002),而PLN不再是其独立预测指标(RFS:P=0.792, OS:P=0.124)。3. Log-rank检验结果显示不同LNR分组(≤0.10,0.11～0.30和>0.30)患者其生存时间具有明显的差异,尤以LNR>0.30患者组最为显著。4. Kaplan-Meier分析显示,PLN风险分类所划定的中度、高度危险组其无复发生存率分别为82.0%和57.1%(χ2=66.374,P<0.001),总生存率分别为92.3%和74.2%(χ2=50.139,P<0.001)；LNR风险分类所划定的中度、高度危险组其无复发生存率分别为80.6%和53.5%(χ2=85.117,P<0.001),总生存率分别为91.0%和71.8%(χ2=61.281,P<0.001)。5.如果将中度危险组的复发或死亡风险比率(hazard ratio, HR)设为1的话,那么PLN风险分类所划定的高度危险组调整后的复发HR为2.88(95%置信区间,2.20-3.76)和死亡HR为3.78(95%置信区间,2.54-5.62)；LNR风险分类所划定的高度危险组调整后的复发HR为2.93(95%置信区间,2.31-3.73)和死亡HR为3.57(95%置信区间,2.54-5.02)。结论LNR是乳腺癌患者的独立预后指标,相对于PLN而言,LNR能更好的评价乳腺癌术后患者的复发风险和总生存时间。LNR联合HER-2表达状态所界定的风险分组不亚于PLN联合HER-2表达状态所界定的风险分组。由于LNR能更好地反映患者的腋窝淋巴结状态,因此我们建议采用LNR联合HER-2表达状态来评价淋巴结转移阳性的乳腺癌患者的预后风险,为临床医生制定辅助治疗方案提供更有力的参考依据。第二部分目的浸润性微乳头状癌(invasive micropapillary carcinoma, IMPC)是一种特殊类型的浸润性乳腺癌,因其特殊的生长模式：集团性生长、主间质分离以及高度的淋巴管侵犯、高淋巴结转移等预后不良的生物学行为,越来越受到临床及病理医师的高度重视。近年来研究发现micro-RNA (miRNA)在肿瘤的发生发展过程中发挥着类似癌基因或抑癌基因的作用,为阐明肿瘤的发病机制并对其治疗提供了崭新的思路。本研究旨在从,miRNA表达水平角度探讨IMPC高淋巴管侵犯、高淋巴结转移等不良生物学特性发生的分子机制。方法选取经福尔马林固定、石蜡包埋的纯型IMPC和非特殊型浸润性导管癌(invasive ductal carcinoma of no special types, IDC-NSTs)组织样本各5例以及新鲜冻存样本各1例进行高通量测序；根据测序结果筛选出差异表达的的miRNA,另外选取22例IMPC和24例IDC-NSTs患者石蜡包埋组织样本,采用实时定量PCR进一步验证测序结果的准确性。结果1.通过对两组样本进行高通量测序,共计获得19%,504，842个序列读数。去除原始数据中的接头序列、低质量标签序列和接头聚合物污染后,共计获得175,300,661(88.76%)个序列读数,序列长度主要集中于21～23个核菅酸大小2.对测序数据整理分析后发现,IMPC和IDC-NSTs两组样本间共存在45种差异表达的miRNA。非监督聚类分析结果显示,由这些差异表达的miRNA所形成的树状图能明显的区分IMPC和IDC-NSTs;来源于两例患者自身配对的石蜡包埋和新鲜冻存样本中,miRNA表达呈现出良好的相关性,Pearson相关系数分别为0.9909(p<0.001)和0.9904(p<0.001)。3.实时定量PCR结果显示,let-7b、miR-30c、miR-148a、miR-181a、miR-181a*和miR-181b在两组样本中的表达水平具有明显的差异,与高通量测序结果一致。4.本组病例miRNA序列存在5’端变异,miRNA编辑和3’端非模板性插入等特点。Drosha酶比Dicer酶能更精确地定义IMPC和IDC-NSTs两组样本中的miRNA5’端；IDC-NSTs患者组miRNA编辑要明显多于IMPC患者组(p<0.05),胞嘧啶转变为胸腺嘧啶(C-to-T)和腺嘌呤转变为鸟嘌呤(A-to-G)分别占miRNA编辑总数的36.4%-44.0%和8.8%-11.4%；就成熟体miRNA编辑的空间定位而言,5、7、8和13～16位核苷酸出现miRNA编辑的频率相对较低；7.4%的miRNA存在3’末端核苷酸的插入,并且绝大部分为腺嘌呤核苷酸(约占58.9%)和尿嘧啶核苷酸(约占33.6%)插入结论1.高通量测序发现IMPC和IDC-NSTs之间存在差异表达miRNA,这些miRNA的聚类分析可以区分IMPC和IDC-NSTs.2.相对于IDC-NSTs而言，let-7b、miR-30c、miR-148a、miR-181a、miR-181a*和miR-181b在IMPC中的低表达可能是造成IMPC高淋巴管侵犯、高淋巴结转移的原因之一。3. IMPC和IDC-NSTs某些miRNA序列存在5’端变异,：miRNA编辑和3’端非模板性插入等现象,但这并非IMPC所特有的影响其高淋巴管侵犯、高淋巴结转移等不良生物学行为的关键因素。4.高通量测序所揭示的乳腺IMPC小RNA特点使我们对IMPC高侵袭性发生的的分子机制有了更加深入的了解。