【摘 要】
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在生物体内,硫化氢(H_2S)是继一氧化氮(NO)和一氧化碳(CO)之后的第三个重要的气体信号分子。因此生物体内以及生物环境中H_2S的识别和定量检测无疑具有重要的意义。荧光探针技术具有反应速度快、灵敏度高和操作简便等优点。1,8-萘酰亚胺组块作为荧光体的核心,具有分子化学性质稳定、荧光量子产率高、斯托克斯(Stockes)位移大、光稳定性好、易修饰和遵循ICT发光机理的特点。具有1,8-萘酰亚胺
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在生物体内,硫化氢(H2S)是继一氧化氮(NO)和一氧化碳(CO)之后的第三个重要的气体信号分子。因此生物体内以及生物环境中H2S的识别和定量检测无疑具有重要的意义。荧光探针技术具有反应速度快、灵敏度高和操作简便等优点。1,8-萘酰亚胺组块作为荧光体的核心,具有分子化学性质稳定、荧光量子产率高、斯托克斯(Stockes)位移大、光稳定性好、易修饰和遵循ICT发光机理的特点。具有1,8-萘酰亚胺结构分子的设计合成及应用,已成为学科研究的前沿和热点。二硒醚类化合物和依布硒啉(ebselen),都是众所周知的谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)模拟物,两者均能与生物体内的含巯基小分子进行亲核加成反应。二硒醚类化合物与硫化氢或生物硫醇的反应是基于二硒醚键的断裂,依布硒啉的的反应基于Se-N键的断裂。根据此原理我们将二硒醚和依布硒啉分别作为反应位点,以1,8-萘酰亚胺作为荧光团,设计并合成了三类共计6个新型含硒荧光探针分子,并对H2S进行了荧光识别和检测。1.第一类目标分子:(1)基于ICT机制,以具有优良的荧光活性和大发射波长的荧光团1,8-萘酰亚胺作为核心,通过酰肼键与二芳基二硒醚拼接,首次设计合成了2个目标分子DSHN(1-2),并对其进行了结构表征。(2)目标分子均是turn-on型荧光探针,随着H2S的加入荧光信号不断增强,在肉眼的观察下溶液由无色逐渐变为淡黄色,达到了裸眼识别的效果。(3)探针分子对H2S达到了专一高选择性识别检测的目的。利用探针分子分别对14种物质(包括阴离子、氨基酸和氧化还原小分子)进行了荧光检测,并在这些物质的存在下进行了对H2S荧光识别的干扰性探究,结果表明其他阴离子、氧化还原小分子,含巯基的生物硫醇均对检测无干扰。(4)利用本探针分子进行了细胞水平的探究,结果表明:目标分子具有良好的细胞膜渗透性和低细胞毒性,并可以应用于细胞成像,说明目标分子可作为检测和识别外源型细胞H2S的荧光探针。2.第二类和第三类目标分子:(1)为对比分子内连接部分(spacer)对于检测H2S的影响,本文以依布硒啉的Se-N键作为反应位点,通过将核心荧光团以对接和直接扣环两种修饰方式合成了第二类荧光探针EPHN(1-2)和第三类荧光探针EHN(1-2),并对其进行了结构表征。(2)两类分子对H2S的荧光识别结果表明,它们均能对H2S选择性荧光识别,并成功实现了探针对实际生活水样中H2S的检测,spacer部分对于探针分子的灵敏度影响不大,证明两类目标分子均有望作为H2S的荧光探针。(3)细胞水平的探究结果也表明,EPHN1具有一定细胞膜渗透性和低细胞毒性,可应用于细胞成像。
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