过氧化氢调节成肌细胞线粒体移动的初步研究

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研究目的:线粒体是具有高度动态结构和移动的细胞器,其能量代谢的副产物—活性氧是多种重要细胞信号转导通路的调节中心,本实验拟以轻度氧化应激模型,研究成肌细胞中线粒体移动的变化,初步探讨外源性H2O2、线粒体移动与能量代谢之间可能的关系。研究方法:主要使用激光共聚焦显微镜,观察轻度氧化应激模型中成肌细胞线粒体的移动。研究结果:原代培养的成肌细胞和C2C12细胞中线粒体呈现出两种移动模式—移动和局部摆动;[Ca2+]i下降能调节成肌细胞线粒体移动短暂增加;外源性适宜浓度H2O2可能通过调节[Ca2+]i影响成肌细胞的线粒体移动;10和100μM H2O2处理成肌细胞不同时间后,观察到成肌细胞中miro基因表达有明显的增加(p<0.05,p<0.01);miro蛋白含量也有明显的增加(p<0.05,p<0.01);外源高浓度H2O2处理成肌细胞后,细胞耗氧速率都呈现短暂的下降,随着外源H2O2处理浓度的递增,细胞耗氧速率减慢的幅度和持续时间逐渐增加;并且,发现100μM、1 mM和10 mM H2O2处理成肌细胞2小时,能诱使细胞中ATP生成量显著下降,分别下降了17%、38%和50%(p<0.01)。研究结论:适宜生理浓度或低浓度的H2O2能够作为细胞的信号分子,它一方面调节miro基因的转录;另一方面,H2O2可能首先调节钙通道的活性,引发骨骼肌成肌细胞肌浆网及线粒体对Ca2+摄入,导致[Ca2+]i出现短暂、小幅度下降,进而出现线粒体移动增加,调节线粒体的重新分布。
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