目的：　　 溶瘤性单纯疱疹病毒可以感染肿瘤细胞并在其内复制，通过直接的细胞毒作用杀灭肿瘤细胞，死亡的肿瘤细胞释放大量病毒从而感染其他细胞。G47△为第三代溶瘤性单纯疱疹病毒载体，它的γ34.5和α47基因均有缺失，并且在ICP6基因(编码核糖核酸还原酶大亚基)区插入E.coli lacZ导致其失活。本研究旨在探讨溶瘤性单纯疱疹病毒G47△对人乳腺癌细胞、乳腺永生化细胞及原代培养的正常乳腺细胞的细胞毒效应，并构建了乳腺癌肺转移动物模型，评估G47△对转移性乳腺癌的治疗作用，同时研究G47△对鼻咽癌、肝癌及甲状腺癌细胞的细胞毒效应及对鼻咽癌皮下移植瘤模型的治疗作用。　　 材料与方法：　　 第一部分：溶瘤性单纯疱疹病毒G47△对人乳腺癌治疗作用　　 体外培养人乳腺癌细胞MDA-MB-453、MCF-7、SK-BR-3、MDA-MB-231、ZR-75-1、乳腺永生化细胞MCF-10A、76N-tert及原代培养正常乳腺细胞HMEC1和HMEC2，将G47△按不同滴度(MOI)加入培养液中，每天观察细胞的生长状态。G47△含有LacZ基因，采用X-gal染色检测被G47△感染的细胞中LacZ基因而证实病毒的存在。通过Balb-c裸鼠尾静脉注射人乳腺癌细胞MDA-MB-435构建乳腺癌肺转移模型，21日后病毒治疗组每周两次尾静脉注射2×107pfu G47△，共四次，空白对照组只注射病毒悬液。60天后处死两组裸鼠，取肺行印度墨汁染色后计数其表面结节数。　　 第二部分：溶瘤性单纯疱疹病毒G47△对人鼻咽癌、肝癌、甲状腺癌的治疗作用　　 体外培养人鼻咽癌细胞(SUNE1、CNE2)、人肝癌细胞(HEP-G2、HEP-3B、.BEL7405)及人甲状腺癌细胞(ARO、FRO、WRO、KAT-5)，将G47△按不同滴度(MOI)加入培养液中，每天观察细胞的生长状态。采用X-gal染色检测被G47△感染的细胞中LacZ基因而证实病毒的存在。通过Balb-c裸鼠尾双侧皮下注射人鼻咽癌细胞CNE2构建鼻咽癌皮下模型，在肿瘤直径约5mm时，病毒治疗组每3天左侧皮下瘤内注射1×106pfu G47△，共两次，空白对照组只注射病毒悬液。游标卡尺测量肿瘤直径并计算肿瘤体积(V=a×b2/2)。肿瘤最大直径达18mm时处死裸鼠，比较两组裸鼠肿瘤大小。　　 结果：　　 第一部分。溶瘤性单纯疱疹病毒G47△对人乳腺癌治疗作用G47△对人乳腺癌细胞MDA-MB-453、MCF-7、SK-BR-3及乳腺永生化细胞76N-tert有较强的杀伤能力。MOI=0.01及MOI=0.1的实验组，感染病毒后第5天，分别有超过85％和95％的细胞已被杀灭；但正常乳腺原代培养细胞不受病毒影响，感染病毒后第5天仍无细胞被杀灭。G47△对乳腺永生化细胞MCF-10A的细胞毒效应较上述肿瘤细胞略轻微，MOI=0.1的实验组，感染病毒后第5天，仅有24.5％的细胞被杀灭。两株人乳腺癌细胞MDA-MB-231及ZR-75-1不受病毒影响，感染病毒后第5天仍无细胞被杀灭。被病毒感染的肿瘤细胞可经X-gal染色检测从而证实病毒在细胞内的复制和传播。在乳腺癌肺转移模型中，病毒治疗组裸鼠平均肺表面结节数仅为1，对照组平均肺表面结节数为10。　　 第二部分：溶瘤性单纯疱疹病毒G47△对人鼻咽癌、肝癌、甲状腺癌的治疗作用G47△对人肝癌细胞HEP-G2及HEP-3B有较强的杀伤能力。MOI=0.01及MOI=0.1的实验组，感染病毒后第5天，分别有超过95％和100％的细胞被杀灭；但人肝癌细胞BEL-7405对G47△的敏感程度较差，MOI=0.1的实验组，感染病毒后第5天，仅有32.5％的细胞被杀灭。人鼻咽癌细胞CNE2与SUNE1对G47△反应较敏感，MOI=0.01及MOI=0.1的实验组，感染病毒后第5天，分别有超过85％和95％的细胞被杀灭。人甲状腺癌细胞对G47△的敏感性略逊于上述细胞，MOI=0.01及MOI=0.1的实验组，感染病毒后第5天，ARO分别有69.6％和93.9％的细胞被杀灭，FRO分别有33.3％和100％的细胞被杀灭，WRO分别有11.1％和37.8％的细胞被杀灭，KAT-5分别有38.7％和83.9％的细胞被杀灭。在鼻咽癌裸鼠皮下模型中，实验组病毒治疗侧肿瘤生长缓慢最终完全消退，对照侧及肿瘤组肿瘤生长迅速，于接种后第21天长至18mm。　　 结论：　　 近期构建的溶瘤性单纯疱疹病毒载体G47△可有效杀伤人乳腺癌细胞、乳腺永生化细胞、鼻咽癌、肝癌及甲状腺癌细胞，但对正常细胞无影响，尾静脉注射G47△可有效治疗肺转移乳腺癌，瘤内注射G47△可有效治疗鼻咽癌皮下模型。由于G47△可通过静脉注射及局部瘤内注射，在感染并杀伤乳腺癌细胞的同时不损伤其他正常细胞，因此，可能为广大癌症患者特别是中晚期及其它治疗方法无效的患者带来一可靠的治疗新途径，值得进一步进行临床验证。