【摘 要】
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目的:1.研究乳酸脱氢酶C4（lactate dehydrogenase C4,LDH-C4）蛋白在乳腺癌组织中的表达,探讨LDH-C4对乳腺癌预后判断的价值。2.探讨LDH-C4表达上调对MCF-7乳腺癌细胞中的生物学影响,并对相关分子机制进行初步研究。方法:1.通过免疫组织化学分析158例乳腺癌石蜡组织中LDH-C4蛋白在的表达情况。分析乳腺癌不同临床病理参数（临床分期、病理类型、分子分型等）
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81802631）; 福建省科技创新联合基金项目（2017Y9073）
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目的:1.研究乳酸脱氢酶C4（lactate dehydrogenase C4,LDH-C4）蛋白在乳腺癌组织中的表达,探讨LDH-C4对乳腺癌预后判断的价值。2.探讨LDH-C4表达上调对MCF-7乳腺癌细胞中的生物学影响,并对相关分子机制进行初步研究。方法:1.通过免疫组织化学分析158例乳腺癌石蜡组织中LDH-C4蛋白在的表达情况。分析乳腺癌不同临床病理参数（临床分期、病理类型、分子分型等）下LDH-C4蛋白表达的差异。对随访资料进行Cox回归模型,研究LDH-C4蛋白在乳腺癌预后判断的临床价值。2.通过慢病毒载体将外源LDHC基因导入MCF-7乳腺癌细胞中,通过稀释法结合绿荧光蛋白表达筛选LDH-C4阳性表达的单克隆细胞系。通过平板克隆、CCK-8细胞增殖、细胞划痕、Transwell小室等细胞生物学实验,研究LDH-C4表达上调对MCF-7细胞生物学行为的影响;Western blot法检测PI3K/AKT/mTOR信号通路相关分子,探讨LDHC基因上调对乳腺癌MCF-7细胞生物学影响的可能机制。结果:1.158例乳腺癌石蜡组织切片免疫组化染色,LDH-C4蛋白染色集中在细胞质中,呈淡棕色到深棕色,阳性率为91.8%（145/158）,其中低表达（-/+）和高表达（++/+++）分别为41.8%（66/158）、58.2%（92/158）。经卡方检验,乳腺癌临床分期晚、腋窝淋巴结转移率高,患病年龄低者LDH-C4呈高表达（P<0.05）;Kaplan-Meier法进行生存分析并经Log-rank检验结果显示,乳腺癌LDH-C4高表达者预后差（P=0.035）;Cox回归分析显示临床分期（P=0.000）和LDH-C4表达水平（P=0.002）是乳腺癌预后的独立因素。2.通过慢病毒感染成功筛选LDH-C4过表达的单克隆化的乳腺癌MCF-7细胞系;细胞学实验结果显示,LDH-C4过表达可增强乳腺癌MCF-7侵袭和迁移能力,而对细胞生长增殖无显著影响;免疫印迹法初步显示,过表达LDH-C4可上调乳腺癌MCF-7细胞中AKT和mTOR蛋白的表达。结论:1.LDH-C4在乳腺癌组织中阳性表达率高,其表达与临床分期、腋窝淋巴结转移相关;高LDH-C4蛋白水平预示乳腺癌不良预后。2.过表达LDH-C4可增强MCF-7细胞增殖、侵袭和迁移能力,其机制可能与AKT/mTOR细胞信号通路的激活有关。
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