目的:从性状、鉴别、常规质量检查、重金属含量、主要成分含量等方面系统地对破壁前后灵芝孢子粉质量进行评价,建立灵芝孢子粉破壁前后指纹图谱,探究二者在抗氧化和调节肠道菌群方面药效作用差异,以期为指导灵芝孢子粉的规范化生产和临床应用提供理论依据。方法:参照《中国药典》(2015年版)中“灵芝”项下各标准,对破壁前后灵芝孢子粉外观性状、显微观察、薄层鉴别、水分、总灰分、浸出物含量进行检查与测定,观察不同温度、湿度、不同厂家生产薄层板对薄层色谱的影响;利用原子分光光度法对重金属含量进行测定;利用紫外-分光光度法对多糖、总三萜含量进行测定;通过HPLC法建立破壁前后灵芝孢子粉指纹图谱;建立小鼠游泳力竭模型,通过检测小鼠血清及肝脏指标和病理切片结果,对比灵芝孢子粉破壁前后抗氧化能力的差异;建立小鼠急性肝损伤动物模型,检测肝功、抗炎指标和病理切片,收集小鼠粪便通过16S rDNA测序,探究灵芝孢子粉破壁前后对肠道菌群变化的影响。结果:1.未破壁与破壁灵芝孢子粉分别显浅棕色与深褐色,显微镜下未破壁孢子粉呈完整卵形,破壁孢子粉呈不规则碎片状;未破壁与破壁灵芝孢子粉与对照品在同一位置显相同颜色荧光斑点,温度、湿度及不同厂家薄层板对薄层色谱无影响;10批破壁与未破壁孢子粉水分平均含量分别为8.16%、10.77%;总灰分平均含量分别为0.87%、0.64%;酸不溶性灰分平均含量分别为0.31%、0.16%;破壁孢子粉重金属Cu、Hg、As、Pd、Cd平均含量分别为16.17、0.023、0.79、2.42、0.34 ppm,未破壁灵芝孢子粉平均含量为13.17、0.018、0.64、2.93、0.44 ppm;浸出物破壁与未破壁孢子粉平均含量分别为5.86%、7.48%;蒽酮硫酸法测得破壁与未破壁孢子粉多糖平均含量分别为1.664%、0.979%;苯酚-硫酸法分别为1.586%、1.001%;总三萜平均含量分别为4.169%、2.292%。2.10批未破壁与破壁灵芝孢子粉共识别出9个共有峰,10批破壁孢子粉样品相似度较好,在96.9%~100.0%之间,10批未破壁孢子粉中W4、W5相似度较低,可能原因是产地及培养时所采用的培养基不同。3.抗氧化药理实验结果显示破壁与未破壁灵芝孢子粉均能不同程度提高力竭小鼠体内抗氧化酶活性,抑制丙二醛、一氧化碳的生成;对力竭所致肝细胞损伤出现的水肿、气球样变性有改善作用。4.肠道菌群实验中,破壁灵芝孢子粉对减少小鼠血清中转氨酶含量、抑制炎症因子的释放有显著作用;未破壁组能降低谷草转氨酶含量,但效果不显著;破壁组肝细胞空泡变性数量少于未破壁组;治疗后破壁组拟杆菌、厚壁菌、放线菌等有益菌多样性高于未破壁组,致病菌如变形菌、念珠菌多样性低于未破壁组。结论:破壁后灵芝孢子粉主要药效成分多糖与总三萜含量均高于未破壁灵芝孢子粉,因此初步认为破壁的灵芝孢子粉质量优于未破壁的灵芝孢子粉;抗氧化能力对比实验说明二者抗氧化的同时,能够对肝脏起到保护作用,破壁组抗氧化酶活性指标高于未破壁组,且损伤面小于未破壁组,说明破壁效果优于未破壁;肠道菌群实验结果可以看出,灵芝孢子粉降低肝细胞中炎症因子含量、调节肠道内群落分布与组成,破壁孢子粉较未破壁孢子粉优势菌群数量增多,致病菌数量减少,说明破壁灵芝孢子粉调节肠道菌群及保护机体能力优于未破壁灵芝孢子粉。