目的:大黄硝石汤为治疗湿热黄疸的代表方。本课题旨在通过分析大黄硝石汤提取物成分及体内成分,揭示大黄硝石汤的药代动力学规律及其有效成分之一-小檗碱的肝肾外排转运机制,为深入研究大黄硝石汤的药效物质提供依据。方法:(1)建立LC-LTQ-Orbitrap MS方法同时定量分析大黄硝石汤提取物中主要成分的含量。(2)建立LC-MS/MS方法同时定量分析血浆中大黄硝石汤多成分的浓度;大鼠灌胃2.4 g/kg大黄硝石汤后,定时采集血样,测定葡萄糖醛酸苷酶及硫酸酯酶水解前后多成分的血药浓度;并采用WinNonlin软件中的非房室模型计算各原形成分及代谢物的药代动力学参数。(3)利用LC-LTQ-Orbitrap MS分析小鼠灌胃大黄硝石汤后进入肝脏的原形成分及代谢物;并研究连续灌胃3.6 g/kg大黄硝石汤4周及8周后在DDC诱导的胆汁淤积小鼠的肝肾组织中分布情况。(4)通过转染细胞、动物实验及分子对接三方面研究大黄硝石汤中主要有效成分之一小檗碱在肝肾中的外排转运机制。结果:(1)成分含量分析的方法学考察结果符合测定要求,共定量了大黄硝石汤中7类21种化学成分,其中小檗碱含量最高,其次为栀子苷。(2)血衆中多成分分析的LC-MS/MS方法学考察结果符合生物样品测定要求;成功测定了大鼠血浆中13种原形成分及水解后12种葡萄糖醛酸化代谢物和硫酸化代谢物在不同时间点的血药浓度,结果表明这些成分具有不同的药动学特征。其中大黄酸、栀子苷和京尼平龙胆双糖苷的t1/2分别为5.88 h、6.37 h和7.78 h;其余成分的t1/2时间均大于9 h;而与其他成分的体内血浆浓度相比,栀子苷和大黄酸的体内血浆暴露量更高。此外,各成分代谢物测定结果表明葡萄糖醛酸化代谢物和硫酸化代谢物是大黄蒽醌类和黄柏碱在大鼠血浆中的主要存在形式。(3)小鼠灌胃大黄硝石汤后肝脏中共定性原形成分及代谢物36种;并在DDC诱导的胆汁淤积小鼠的肝脏和肾脏中共定量测定了 13种原形成分及水解后12种葡萄糖醛酸化代谢物和硫酸化代谢物,同时发现肝肾中浓度最高的3个原形成分分别为栀子苷、大黄酸和小檗碱;此外,我们还发现小檗碱的组织/血浆浓度比值最高。(4)通过转染细胞、动物实验及分子对接三方面揭示了P-糖蛋白和多药及毒素外排转运蛋白共同介导了小檗碱的肝肾外排。结论:本研究通过定量分析大黄硝石汤提取物成分及体内成分,阐明了大黄硝石汤的药代动力学规律及其有效成分之一小檗碱的肝肾外排转运机制。