沙利度胺联合三氧化二砷对急性髓系白血病细胞表达VEGF和P-gp的影响

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目的:观察沙利度胺(TLD)和三氧化二砷(As2O3 )对急性髓系白血病(AML)细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)和表达P-糖蛋白(P-gP)的影响。方法:收集AML患者和健康体检者的血液,肝素抗凝并离心后,吸取上层血浆置-20℃冰箱内冷冻保存。收集AML患者的骨髓液,用Ficoll淋巴细胞分离液分离出骨髓单个核细胞(BMMNC)。37℃、5%CO2、饱和湿度条件下培养细胞于RPMI l64O培养液中。HL-60/VCR细胞株的培养基中加入VCR以维持耐药性。TLD和As2O3以不同浓度加入培养体系中,同时设空白对照。用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)法检测血浆和细胞培养上清液中VEGF的浓度,用流式细胞术(FCM)检测细胞膜上MDR1/p-gp的表达率。结果:(1)AML患者血浆中VEGF浓度明显高于正常对照组(P<0.01)。(2)加入TLD和As2O3后,AML细胞和HL-60/VCR细胞株培养上清中VEGF浓度明显降低。(3)加入TLD和As2O3前后,AML细胞和HL-60/VCR细胞株的细胞膜上P-gP的表达率未见明显改变。(4)加入TLD和As2O3前后,AML细胞培养上清中VEGF的升高和细胞膜表面PgP的表达具有一定的正相关性。结论:(1)白血病细胞可以通过自分泌途径分泌VEGF。(2)TLD和AS2O3均可抑制HL-60/VCR和AML细胞分泌VEGF。(3)TLD和AS2O3均未能影响HL-60/VCR和AML细胞膜上P-gP的表达。(4)AML患者BMMNC培养上清中VEGF的升高和细胞膜表面PgP的表达具有一定的正相关性,二者联合检测可作为监测病情和判断预后的指标。
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