壳寡糖的酶法制备及其抗菌性的研究

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采用实验室筛选菌种Penicillium SP.ZD-Z1进行发酵65-70h以后,发酵液经过抽滤、超滤、乙醇沉淀和冷冻离心浓缩等步骤,最后经过阳离子交换分离得到壳聚糖酶内切酶ChA和外切酶ChB。经过内切酶ChA与外切酶ChB降解的2%(W/V)壳聚糖溶液,用截留分子量为2kDa的膜进行超滤,得到分子量小于2kDa的滤过液,经真空浓缩、喷雾干燥,得到产品S1和S2。 直接通过发酵的方法,经过65h后,放罐,分别通过截留分子量为10kDa、5kDa和2kDa的膜超滤,经真空浓缩、喷雾干燥,得到产品S3(0-2kDa)、S4(2k-5kDa)和S5(5k-10kDa)。 实验中通过乙酰丙酮的方法测定了不同分子量的壳寡糖产品S1(内切酶降解)、S2(外切酶降解)和发酵法直接制备的S3、S4和S5,这五种壳寡糖的相对分子质量分别为3726、475、2133、5170和8952。 实验中测定了五种不同分子量的壳寡糖产品S1、S2、S3、S4和S5对大肠杆菌性和枯草芽孢杆菌的抗菌性能试验,实验结果表明:随着壳寡糖分子量的增大抑制大肠杆菌的能力逐渐减弱,随着分子量的增大抑制枯草芽孢杆菌的能力逐渐增强,且随着浓度的增加抗菌作用增加。在浓度为0.5%时的样品S4和S5,对枯草芽孢杆菌的抑制率就达到了90%以上,S3在此浓度的抑制率才只有85.5%。而壳寡糖S2对枯草芽孢杆菌根本没有抑菌的效果,而且随着浓度的增大,与空白相比菌落的数目更多些,在壳寡糖浓度为0.25%、0.5%和1%的平板中的菌落数目分别大约是对照的4.8、3.0和1.3倍。 以壳寡糖S1、S2和S3为材料,研究了不同样品、不同浓度的壳寡糖对几种常见的危害农作物比较大的植物病原菌的拮抗作用。结果表明,S1的抗菌效果要明显优于S3,壳寡糖S2在高浓度下对大部分菌种基本上没有抑菌作用,反而促进了病原菌的生长。
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