第一部分 微重力旋转培养系统对骨髓间充质干细胞分化增殖的影响 目的 观察不同的培养方法对附着于三维载体上的骨髓间充干细胞(MSCs)增殖分化能力的作用 方法 对取自4只新西兰大白兔的骨髓经全骨髓法进行分离培养,免疫组化法检测MSCs表面抗原以进行细胞鉴定。随后将细胞置于不同的三维载体上,经过短暂静置培养后,转移入静置培养组和微重力旋转培养组,以相同的培养液进行培养,MTT法观察细胞代谢活力变化,描绘细胞增殖曲线,电镜下观察细胞及载体超微结构的变化。 小结 经过微重力旋转培养,不同载体上的MSCs表现出更强的增殖能力和细胞活性,与载体的结合也更为紧密。 第二部分 微重力旋转培养系统对骨髓间充质干细胞体外软骨化诱导的影响 目的 观察不同培养方法对于附着于三维载体上的骨髓间充质干细胞(MSCs)体外成软骨化诱导的影响 方法 将传代至第3～5代的MSCs附着于三维载体壳聚糖上,经过短暂的静置培养后,转移入静置培养组和微重力旋转培养组。各培养组中加入以TGF-β1为主要成份的成软骨诱导剂,经过两周的体外诱导,通过RT-PCR和Western-blot检测软骨细胞特异性产物的表达,以比较不同培养方法对MSCs体外成软骨化的