大岩桐开花相关基因的功能研究及花瓣发育过程中内源激素动态变化的定量分析

来源 :杭州师范大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:hao68
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SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CONSTANS1(SOC1)是各种诱导开花途径中的一个关键整合子,它整合了来自光周期途径、春化途径、自主途径和赤霉素途径等诱导开花途径的各种信号,促进植物开花。我们实验室从大岩桐中克隆到两个SOCl的同源基因SsSOC1a和SsSOC1b,为了进一步研究这两个基因的功能,本研究以大岩桐(Sinningia speciosa)和烟草(Nicotiana tobacum)幼叶为材料,通过根癌农杆菌介导法将SsSOC1a和SsSOC1b转化烟草和大岩桐,初步研究了大岩桐SsSOC1a和SsSOC1b的功能。同时,对大岩桐花瓣发育过程中四种内源激素的动态变化做了定量分析,为进一步研究花器官发育的激素调控机制积累科学素材。本研究获得的主要结果如下:1.利用根癌农杆菌介导法将SsSOC1b成功导入烟草中,共获得8株转基因烟草植株。与野生型烟草相比,转基因烟草植株表现出两类差异显著的表型,第一类表型的转基因植株与野生型相比,株高显著增加,花芽分化更早,分化的花芽更多,开花时间提前;而第二类表型的转基因烟草株高与野生型无明显差异,但在整个生命周期中都没有花芽分化。这表明,SsSOC1b基因不仅影响烟草的花芽分化和发育,还影响株高的发育。2.利用根癌农杆菌介导法将SsSOC1a和SsSOC1b成功导入大岩桐,共获得5株转SsSOC1a的抗性苗和8株转SsSOC1b的抗性苗。转SsSOC1a的大岩桐移栽48d和58d的花芽分化率分别为61.3%和84.6%,而此时野生型和转SsSOC1b植株的花芽分化率为零;转SsSOC1a大岩桐的花芽开放时间也明显早于野生型,比野生型提前10-12d开花,而转SsSOC1b大岩桐的花时与野生型无明显差别。3.采用间接酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,简称ELISA)测定了大岩桐花瓣发育过程中4种内源激素含量的动态变化。结果显示4种内源激素在花瓣发育过程中的含量和动态变化存在明显差异。内源ABA在花瓣中含量最高,内源IAA在花瓣中含量极低;内源ZRs在花瓣发育初期,即小花蕾时期含量较低,在初开期出现一个小峰值,在盛花期略有下降,但含量高于花瓣发育初期;内源IAA在大岩桐花瓣发育初期含量较低,在初开期出现一个低峰值,随后逐渐回升,在盛花期含量达到最大值;内源GA含量在整个花瓣发育过程中有较为显著的波动,呈M字形变化,分别在大花蕾时期和初开期出现两个高峰值;内源ABA在小花蕾发育期出现一个高峰值,然后迅速下降,保持在与花瓣发育初期含量相差不大且较为稳定的水平。
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