本文主要是对柳蚕卵黄原蛋白基因cDNA的克隆和序列分析。柳蚕(Actias selene Hubner) 是属于鳞翅目 (Lepidoptera) 大蚕蛾科 (Saturniidae)的一种野生绢丝昆虫，国内外对其相关研究较少。文中通过SDS-PAGE 和 Westernblotting 鉴定了柳蚕的卵黄原蛋白是由大小两个亚基组成，分子量分别为175kD和45kD，存在组织、时期、性别表达的差异性。利用昆虫卵黄原蛋白进化上的保守性，根据已经解析出的家蚕、天蚕、柞蚕、蓖麻蚕、樟蚕、野桑蚕、樗蚕卵黄原蛋白cDNA序列设计4对特异性引物对柳蚕的总RNA进行RT-PCR扩增，分别得到4条大小分别为1000bp、1000bp、2200bp、1700bp左右的cDNA片段；对于3’-end进行RACE扩增，得到了1条750bp左右的cDNA片段，因cDNA片段的重叠性好，从而解析出柳蚕卵黄原蛋白cDNA的全序列。 1.序列含有5701碱基，由一个ORF组成，编码1774个氨基酸，卵黄原蛋白的氨基酸序列和cDNA序列与樟蚕、天蚕、柞蚕、野桑蚕、家蚕、樗蚕、蓖麻蚕的同源性分别为83.1％、81.1％、81.0％、64.7％、64.6％、79.7％、79.2％和82.5％、82.6％、82.7％、60.2％、60.4％、79.8％、79.9％。含有特定的酶切识别位点RSRR，卵黄原蛋白前体被酶切为大小两个亚基，根据氨基酸推算的相对分子质量分别为161.565KD和39.654KD，如果考虑到翻译后的修饰，这与SDS-PAGE 鉴定的结果是吻合的。 2.序列含有两个多聚丝氨酸区，分别在切割位点前14个和后24个氨基酸处，DGQR和GIcG分别出现在第1573和1590氨基酸处，C末端含有6个保守的半胱氨酸。根据已经解析的8种绢丝昆虫卵黄原蛋白的氨基酸序列构建了系统树，结果证明了昆虫卵黄原蛋白的一级结构在进化上具有很好的保守性。柳蚕卵黄原蛋白cDNA序列已登录GeneBank，登录号为EE523567。