反溶剂法制备的熊果酸纳米粒及其口服生物利用度研究

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熊果酸(Ursolic Acid,UA)是一种五环三萜类化合物,具有抗肿瘤、抗炎、抗菌、免疫调节等多种生物活性。但其不溶于水,口服生物利用度仅有0.7%,极大地影响了熊果酸在临床实践中的应用。为了提高熊果酸的口服生物利用度,本文采用反溶剂法,分别以TPGS1000、泊洛沙姆188(P188)作为稳定剂制备熊果酸纳米粒。以平均粒径、粒径分布(PDI)和Zeta电位作为评价指标,优化处方和制备工艺,所制得的纳米粒悬液稳定性均较好(Zeta电位-20~-25 mV),粒度分布均匀(PDI<0.2),粒径大小分别为127 nm(TPGS1000)和140 nm(P188)左右。通过扫描电子显微镜、X射线衍射仪、差示热量扫描仪和红外光谱仪对熊果酸纳米粒进行了微观和物化性质的表征,发现为圆形粒子,大小均一;制备过程没有影响熊果酸的化学结构,只是影响了熊果酸的晶型,使由长棱状转变为无定型/部分无定型状态。纳米悬液属于热力学不稳定系统,为了提高其稳定性和使用方便,本文应用冷冻干燥法制备了熊果酸纳米粒粉末。以外观、再分散性和SEM图像为评价指标,研究了多种冻干保护剂单独或联合使用对冻干效果的影响。发现在TPGS1000-UA纳米悬液中添加10%海藻糖,P188-UA纳米混悬液添加10%海藻糖或者3%PEG2000作为冻干保护剂,冻干制得的粉末外观良好,疏松、无塌陷,再分散性好。其中,前者再分散悬液的粒径为239.2±5.2 nm,PDI=0.243±0.013,Zata电位-23.8±2.6 mV,后者的再分散悬液测量参数分别为粒径228.4±9.8 nm,PDI=0.399±0.022,Zata电位-23.8±3.1 mV和粒径208.1±8.6 nm,PDI=0.335±0.025,电位为-31.6±3 mV。通过体外释放实验发现,冻干粉末再分散液与新鲜制备纳米混悬液的释放过程,不存在明显差异(P>0.05),但是P188-UA纳米悬液比TPGS1000-UA纳米悬液溶出释放缓慢。在大鼠灌胃给药实验中,TPGS1000-UA纳米混悬的血药浓度-时间曲线面积(AUC0→12)是原料药的26倍左右,P188-UA纳米混悬AUC0→12是原料药的2倍左右。实验表明,TPGS1000明显促进了熊果酸的吸收,提高了其生物利用度。
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