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研究目的和背景:随着肝脏外科手术技术的提高,器械设备和医用材料的发展,肝脏外科在各种肝脏良恶性疾病的治疗中发挥着越来越重要的作用。而且可进行手术范围更广、难度更大、危险度更高的肝脏外科手术。但是成功而又安全地完成这些手术后也需要更为理想的药物保证术后的顺利恢复。N-α-三甘氨酰-8-赖氨酸-加压素(Terlipressin,特利加压素,后简称为加压素)作为一种人工合成的血管加压素类似物,能选择性的收缩胃肠道的毛细血管床,从而显著的降低门静脉的压力,对肝硬化门静脉高压的一些常见并发症有良好的疗效。近期发现加压素能使肝大部切除术后肝功能得到明显改善,降低小肝综合征甚至肝功能衰竭的发生概率。更有研究证明加压素可以通过降低肝切除术后的高门静脉压力,从而促进残肝的再生。本研究旨在进一步探讨加压素对肝大部切除术后肝细胞再生的促进作用及其机制。研究方法:收集2016年11月至12月和2017年5月至12月在上海东方肝胆外科医院特需治疗一科/肝移植科行肝部分切除术的患者42例,其中术后静脉应用加压素21例,作为用药组;未应用加压素21例,为对照组,进行回顾性队列研究。监测其术后第一天和第三天的肝功能的结果进行对比。模拟人体肝大部切除建立小鼠肝大部切除模型,选取术后(24小时、48小时、72小时和96小时)4个时间点将应用加压素的实验组和安慰剂组的小鼠肝脏再生指标进行比较。然后对小鼠肝脏标本进行基因表达谱芯片的检测,探索加压素促进残肝细胞再生的可能机制。采用人正常肝细胞株(normal liver cells,HL7702)进行体外分组实验。以添加了加压素的培养基培养的细胞作为实验组细胞,普通培养基培养的细胞作为对照组细胞。利用细胞计数试剂盒-8(Cell Counting Kit-8,CCK8)对两组细胞的相对增殖活性进行比较。利用流式细胞仪(Flow cytometry instrument,FCM)进行两组细胞细胞周期的检测和比较。最后采用逆转录-聚合酶链式反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)对基因芯片筛选出的可能的机制进行验证。研究结果:临床结果显示:肝大部切除术后第一天用药组和对照组丙氨酸氨基转移酶(Alamine aminotransferase,ALT)分别为:188.71±136.22和444.43±290.40U/L,(P=0.004);天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase,AST)分别为:377.76±147.56和648.67±421.07U/L,(P=0.009);凝血酶原时间(Prothrombin time,PT)分别为:13.41±1.47和14.76±1.54S,(P=0.028);总胆红素(Total bilirubin,TB)分别为:22.79±11.44和37.35±19.14μmol/L,(P=0.008)。上述指标两组间均具有显著差异。术后第三天两组的ALT分别为:166.24±96.91和273.62±133.89U/L,(P=0.025);TB分别为:33.92±18.71和45.19±24.61μmol/L,(P=0.008);白蛋白(Albumin,ALB)分别为:40.10±3.40和37.12±2.55g/L,(P=0.002);前白蛋白(Prealbumin,PA)分别为:88.57±27.71和57.00±20.56㎎/L,(P=0.000);PT分别为:13.67±0.98和15.35±1.87S,(P=0.003)。上述指标两组间均具有显著差异。小鼠肝大部切除模型显示:实验组小鼠肝体重比显著高于安慰剂组。其中术后24小时,实验组和安慰剂组分别为:0.02533±0.000577和0.01667±0.002082,(P=0.002);术后48小时两组分别为:0.02881±0.004116和0.02174±0.000659,(P=0.043)。实验组的残肝细胞核分裂像显著多于安慰剂组,分别为:31.33±2.082和20.67±1.528,(P=0.002)。术后24小时和48小时实验组残肝组织免疫组化Ki 67染色阳性率也显著高于安慰剂组。术后24小时两组分别为:30.1%±0.42和8.57%±1.06,(P=0.001);术后48小时两组分别为:42.14%±4.92和9.42%±1.11,(P=0.012)。术后24小时和术后48小时实验组血清HGF显著高于安慰剂组,术后24小时两组分别为:3663.35±200.86和1936.77±394.22pg/ml(P=0.002);术后48小时两组分别为:532.80±65.38和274.68±19.46pg/ml(P=0.003)。残肝组织的基因表达谱芯片结果显示用药组相较于安慰剂组高表达的基因主要与细胞周期相关。细胞实验显示加压素处理的实验组第96小时的CCK8检测值显著高于对照组,两组的倍增数分别为:6.28±0.18和5.46±0.01,(P=0.009)。FCM细胞周期检测结果实验组处于S期的细胞比例明显高于对照组,分别为:25.19%和17.55%。RT-PCR结果也证实了加压素分别处理24小时和48小时后实验组细胞Cyclin B1基因和CDC20基因的表达明显高于对照组。术后24小时和48小时Cyclin B1基因两组表达结果分别为:2.82±0.08和1.00±0.04,(P=0.001),以及3.11±0.06和1.00±0.03,(P=0.000);术后24小时和48小时CDC20基因两组表达结果分别为:3.27±0.07和1.00±0.03,(P=0.001),以及3.89±0.03和1.00±0.05,(P=0.000)。研究结论:加压素可以加速患者肝大部切除术后残肝功能的恢复,可以促进肝大部切除术后小鼠残肝的再生,也可以促进HL7702细胞株细胞的增殖;其促进残肝再生和肝细胞增殖可能的作用机制是通过上调Cyclin B1基因和CDC20基因的表达实现的。