磷酸肌酸钠预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

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目的磷酸肌酸钠(phosphocreatine, Pcr)是一种高能磷酸键的贮能化合物,能直接穿过细胞膜,释放高能磷酸键合成ATP,补充细胞内能量;研究表明,PCr除及时有效提供能量外,还能通过多种机制减轻机体缺血-再灌注损伤。PCr对心肌缺血-再灌注损伤具有防治作用,对严重颅脑外伤、新生儿缺血缺氧性脑病的治疗,具有保护及修复神经元的功能。但其对肝脏缺血再灌注损伤的作用如何尚未阐明。本研究拟观察不同剂量Pcr对大鼠肝脏部分缺血/再灌注损伤的影响并初步探讨其机制。方法健康雄性SD大鼠30只,体200-250g,采用随机数字表法,将其分为5组(n=6):假手术组(S组)、肝缺血再灌注组(I/R组)、Pcr50mg/kg+I/R组(PL组)、Pcr150mg/kg+I/R组(PM组)、Pcr450mg/kg+I/R组(PH组)。I/R组:上腹部正中切口,分离显露肝门,参照文献介绍的方法,用无损伤动脉夹夹闭肝左中动脉及其门静脉,制备70%肝实质缺血模型,缺血90min后松开动脉夹进行再灌注4h。Pcr预处理组与阻断前60min将50mg/kg、150mg/kg、450mg/kg Pcr溶于1ml生理盐水经尾静脉给药,余操作同I/R组。S组和I/R组夹闭前60min输注等量(1ml)生理盐水。每组观察指标:血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肿瘤坏死因子-α()的含量,免疫组化测定肝组织细胞间粘附分子(ICAM-1)的表达水平,TUNNEL法检测肝细胞凋亡计算凋亡指数,常规病理及电镜观察肝脏的病理学改变及肝细胞中性粒细胞的浸润情况。统计学处理:采用SPSS13.0软件进行统计分析,正态分布的计量资料以均数±标准差(x±s)表示,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果与S组比较,I/R组肝组织匀浆MPO、血清ALT、AST活性及TNF-α、IL-1β的含量升高,肝细胞凋亡数目增加(P<0.05);与I/R组比较,PL组、PM组、PH组肝组织匀浆MPO、血清ALT、AST活性及TNF-α、IL-1β的含量降低,肝细胞凋亡数目减少(P<0.05);PL组、 PM组、PH组随着磷酸肌酸钠剂量增加,肝组织匀浆MPO、血清ALT、AST活性及TNF-α、IL-1β的含量逐渐降低,肝细胞凋亡数目下降(P<0.05)。结论磷酸肌酸钠可减轻肝脏缺血/再灌注损伤,其机制与抑制细胞间粘附分子(ICAM-1)的表达,减少中性粒细胞与血管内皮细胞粘附有关。
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