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目的:初步探讨人乳外泌体miRNA与新生儿母乳性黄疸发生的相关性;分析母乳中油酸、亚油酸和二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic Acid,DHA)对新生儿母乳性黄疸母乳性黄疸(breast milk jaundice,BMJ)发生的影响及其相关机制探讨。方法:选取2016.9-2016.12上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心新生儿病房收治的母乳性黄疸所致重度高胆红素血症新生儿病例为BMJ组,以同期在“优艾贝”国际月子会所的纯母乳喂养健康无黄疸新生儿作为对照组,每组各6例。本研究首先利用透射电镜、粒径分析、细胞流式和Western blotting四种方法鉴定从母乳中提取的外泌体囊泡;然后用高通量测序的方法对两组母乳外泌体样本miRNA进行测序,筛选差异表达miRNA,利用生物学信息方法预测靶基因,并筛选其中可能与新生儿胆红素代谢相关的miRNA及其靶基因;其次,本研究扩大样本量12例/组,利用荧光定量PCR的方法验证了hsa-miR-206、hsa-miR-224-5p、hsa-miR-409-3p、hsa-miR-574-3p和hsa-miR-127-3p在组间的表达差异;同时,利用MIRIS母乳分析仪检测母乳宏量营养素和能量,利用气相色谱检测母乳中油酸、亚油酸和DHA的含量,并分析母乳中宏量营养素和脂肪酸与新生儿母乳性黄疸发生的相关性。利用SPSS 22.0进行统计学数据分析,组间差异差异显著性利用两组独立样本t检验比较。结果:(1)母乳中富含外泌体,而母乳外泌体中富含多种miRNA,尤其是let-7g-5p、let-7b-5p、hsa-miR-21-5p、hsa-miR-375、hsa-miR-99a-5p、hsa-miR-27a-3p、hsa-miR-181-5、hsa-miR-141-3p等在两组母乳外泌体中含量普遍较高。(2)实时荧光定量结果显示,与对照组相比,BMJ组母乳外泌体中hsa-miR-409-3p(P=0.003)、hsa-miR-574-3p(P=0.0002)和hsa-miR-127-3p(P=0.002)的含量明显较高,且差异有统计学意义。(3)生物信息学分析提示,hsa-miR-409-3p、hsa-miR-574-3p、hsa-miR-127-3p的靶基因均包括UGT1A1基因。(4)反-9-反式油酸和DHA的含量在BMJ组和对照组之间有明显差异(P值分别是0.03和0.005)。(5)母乳宏量营养素和能量在BMJ组和对照组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)母乳外泌体含有多种miRNA,尤其富含与新生儿免疫调节和生长发育相关的miRNA。(2)母乳外泌体中存在多种miRNA可参与调控新生儿胆红素代谢途径:其中,hsa-miR-409-3p、hsa-miR-574-3p和hsa-miR-127-3p是三个在BMJ显著高表达的miRNA,可能与新生BMJ的发生相关,其机制可能是miRNA调控BMJ相关基因UGT1A1的表达,从而可影响新生儿BMJ的发生。(3)母乳中反-9-反式油酸和DHA的含量可能与新生儿BMJ的发生相关。