论文部分内容阅读
肉桂挥发油是从干燥肉桂皮中提取得到的一种具有特殊香气的、黄色或黄棕色的挥发油,具有退热、镇痛、抗菌、抗真菌等多种药理作用,主要活性成分为桂皮醛。由于肉桂挥发油具有水溶性差、易氧化、易挥发等缺点,极大地限制了其在药物制剂和食品工业中的广泛使用。为了增加挥发油的稳定性,目前常采用环糊精包合、多孔材料吸附和微囊包覆等方法对其进行包合固化,但这些方法存在包合工艺复杂、辅料用量大、一些成分在体内释放缓慢、稳定性差、水不溶等不足。本课题拟选用共聚维酮和Soluplus作为辅料,通过喷雾干燥制备水溶性微球,微球可以通过共聚维酮和Soluplus的疏水基团组成的疏水区包合肉桂挥发油,实现包合和固化肉桂挥发油的目的。具体研究内容包括以下四部分:1水溶性微球的制备及工艺优化为了优选微球的制备工艺,本实验首先以微球收率作为考察指标,采用单因素实验法,对微球的处方组成进行了优选,确定了处方由共聚维酮与Soluplus共同组成;接着以肉桂挥发油包合率为考察指标,采用单因素实验法,对辅料药物比例进行了优选,确定空白微球与肉桂挥发油比例为8:1较为合适;然后以微球收率和肉桂挥发油包合率作为考察指标,采用L 9（3 4）正交试验法,对微球的包合工艺进行筛选,确定最适宜工艺为共聚维酮-Soluplus（质量比）12:1,浓度0.08 g/m L,水浴温度70℃,搅拌时间2.5 h;最后以微球收率和肉桂挥发油包合率作为考察指标,采用L 9（3 4）正交试验法,对微球的喷雾干燥条件进行了筛选,确定了最适宜的喷雾干燥参数为进风温度160℃,出风温80℃,蠕动泵转速400 m L/h。本研究所优选的工艺重复性好,可行性强,为固化肉桂挥发油奠定了基础。2肉桂挥发油微球包合物的评价为了评价肉桂挥发油微球包合物,本实验采用透射电子显微镜（TEM）、扫描电镜（SEM）、差示扫描量热分析（DSC）、X射线衍射分析（XRD）等方法对所制备的肉桂挥发油微球包合物进行物相表征,采用高效液相色谱法（HPLC）测定桂皮醛的包合率,采用摇床法测定体外溶出度,采用60℃稳定性研究考察稳定性。结果表明,TEM下观察空白微球及微球包合物均呈现均匀的类球状结构,分散均匀;SEM下观察,二者均为表面有内凹的球形;微球包合物DSC图中肉桂挥发油的吸热峰和XRD图中衍射峰均消失,说明肉桂挥发油以非聚集的形式分散包合于微球中;肉桂挥发油的包合率98.38%;体外溶出实验在180 min内,微球包合物累积释放率近93.36%,与肉桂挥发油接近,高于β-环糊精包合物;微球包合物60℃稳定性研究挥发油损失率明显低于肉桂挥发油及β-环糊精包合物。总之,肉桂挥发油能较好包合于微球的疏水区中,稳定性得到提高,释放速率受影响较小。3肉桂挥发油微球包合物的药代动力学研究为了比较肉桂挥发油包合前后体内生物利用度的差异性,本实验采用HPLC法测定了大鼠口服肉桂挥发油、微球包合物、β-环糊精包合物的药动学参数。Alltima C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为甲醇-0.1%磷酸水（62:38）,检测波长为278 nm,流速为1 m L/min,柱温35℃。大鼠每组按50 mg/kg肉桂挥发油的单剂量灌胃,眼眶底静脉丛取血,血浆经甲醇处理后进入HPLC测定肉桂酸含量,用DAS软件计算药动学参数。经方法学考察,血浆中肉桂酸线性范围为0.00303～0.30300 mg/ml,精密度、稳定性及回收率均良好,符合生物样本的分析要求。药代动力学参数显示,微球包合物和β-环糊精包合物在大鼠体内的消除半衰期(t1/2z)相对于肉桂挥发油有所延长,微球包合物的药峰浓度(Cmax)远远高于β-环糊精包合物,三组药物AUC（0-∞）接近,没有显著性差异。结果表明,肉桂挥发油被微球或β-环糊精包合后在体内溶出速度降低。4肉桂挥发油微球包合物的药效学研究为了比较肉桂挥发油包合前后药效的差异性,本实验建立了扭体法疼痛模型,评价肉桂挥发油小鼠体内的镇痛效果。实验分别为5组,分别为肉桂挥发油组、微球包合物组、β-环糊精包合物组、空白对照组、阿司匹林阳性药组,按50 mg/kg肉桂挥发油的剂量灌胃,空白组以同等体积生理盐水灌胃。结果显示,肉桂挥发油、微球包合物、β-环糊精包合物能明显的减少小鼠的扭体次数,产生较好的镇痛作用,镇痛率分别为53.00%、47.52%、21.15%,研究结果表明,肉桂挥发油经微球包合后镇痛作用略有下降,经β-环糊精包合后镇痛作用显著下降。镇痛实验的结果说明,微球包合挥发油后会降低挥发油的体内溶出,但是影响要低于环糊精包合物。综上所述,本文优化了包合肉桂挥发油的微球处方和制备工艺参数,以肉桂油和肉桂油-β-环糊精包合物为对照,对肉桂油微球包合物进行了表征、体外释放和60℃稳定性研究,比较了挥发油包合前后的生物利用度和镇痛药效,结果显示:共聚维酮-Soluplus喷雾干燥微球包合肉桂挥发油有利于提高挥发油的稳定性,相对于β-环糊精包合物对体内外桂皮醛的溶出、血药浓度和镇痛药效影响更小。共聚维酮-Soluplus喷雾干燥微球包合肉桂挥发油是提高挥发油稳定性的新方法,为中药挥发油的包合提供了新的思路。