羊胎盘肽体外抗氧化能力及对人皮肤成纤维细胞的影响研究

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通过研究羊胎盘肽体外抗氧化能力及对人皮肤成纤维细胞的影响,为将羊胎盘肽加工成护肤品做初探。在体外通过化学法测定其还原力、清除·OH及DPPH自由基的能力来衡量其抗氧化能力。以人皮肤成纤维细胞为研究对象,施加不同浓度的羊胎盘肽,来探讨羊胎盘肽对成纤维细胞增殖及分泌羟脯氨酸、透明质酸的作用;用双氧水建立成纤维细胞损伤模型,探讨羊胎盘肽对该损伤的保护作用。  采用超滤法提取分离出羊胎盘肽,Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳鉴定其分子量,体外通过化学法测定其还原力、清除?OH及DPPH自由基的能力;体外培养人皮肤成纤维细胞,不同浓度的羊胎盘肽处理48h后,分别用MTT法测定细胞的增殖活性,消化法测定羟脯氨酸含量,酶联免疫吸附法测定透明质酸的含量。  分离得到的黑山羊胎盘肽提取液为微黄色透明液体,在252nm下有最大吸收,电泳显示有条带且分子量集中在10kD左右;在体外羊胎盘肽有还原能力且呈剂量依赖关系,能清除羟基自由基及DPPH,半数抑制浓度分别为67.05mg/mL和19.45mg/mL;多肽浓度为0.005%,0.01%,0.05%,0.1%时,实验组MTT测定的OD值高于对照组,且有极显著差异;与对照组相比,0.005%,0.01%的多肽组羟脯氨酸含量显著升高(p<0.01),0.001%多肽处理组透明质酸含量显著提高(p<0.01);对于双氧水引起的细胞损伤,多肽处理组(浓度在0.001%-0.01%)细胞存活率高于阴性对照组,且有极显著差异。  羊胎盘肽是小分子肽类物质,在体外具有一定的抗氧化能力;一定浓度范围内的羊胎盘肽能显著促进成纤维细胞的增殖及羟脯氨酸、透明质酸的分泌,对双氧水引起的氧化损伤也有一定保护作用。
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