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第一部分骨髓间充质干细胞的体外分离、培养及鉴定目的：全骨髓贴壁法体外分离培养及鉴定大鼠骨髓间充质干细胞,为后续实验打下基础。方法：取4周龄SD大鼠,体外分离培养骨髓间充质干细胞,经连续传代纯化,流式细胞术进行鉴定。结果：骨髓间充质干细胞呈成纤维细胞样形态,梭形或纺锤形,漩涡状或辐射状排列,P3代及以后的细胞形态均一,生长旺盛,无明显衰老现象。BMSCs高表达CD29. CD90,而不表达造血干细胞的表面标记CD45, CD11b。结论：全骨髓贴壁法体外分离培养的骨髓间充质干细胞形态均匀、状态稳定,纯度高,形态学及流式细胞学鉴定符合间充质干细胞特点。第二部分BMSCs移植治疗溃疡性结肠炎大鼠的实验研究及复方苦参汤的干预目的：BMSCs移植及复方苦参汤干预后,观察实验大鼠疾病活动指数(disease activity index, DAI),结肠病理组织学改变并评分。方法：8周龄清洁级SD大鼠,采用2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid, TNBS)构建溃疡性结肠炎模型；慢病毒(Lentiviral Vector, LV)介导绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein, GFP)转染BMSCs;标记后的BMSCs于造模后进行移植,同时以复方苦参汤灌胃干预；免疫荧光组化及weston blot检测结肠组织GFP表达,对各组大鼠进行疾病活动指数(DAI)评估,并观察结肠组织病理学改变进行评分。结果：1、BMSCs移植及复方苦参汤干预2w后,免疫荧光组化及weston blot显示,BMSCs组和二联组结肠炎性受损区可见GFP表达；2、与空白组相比,PBS组的DAI评分显著上升,与PBS组相比,BMSCs组和二联组能够下降DAI分数(P<0.05);3、与空白组相比,PBS组的组织病理学评分显著增加,与PBS组相比,BMSCs组及二联组的评分下降(P<0.05)。结论：BMSCs和复方苦参汤干预后结肠炎大鼠症状得到了明显的缓解,结肠组织受损得到修复。第三部分BMSCs治疗溃疡性结肠炎的免疫机制研究目的：研究BMSCs治疗溃疡性结肠炎的相关免疫作用机制方法：体外分离培养BMSCs,流式细胞术进行鉴定,LV-GFP转染BMSCs进行标记,TNBS诱导溃疡性结肠炎动物模型,实验分为四组：空白组,PBS组,BMSCs组,BMSCs组+中药组。PBS/BMSCs经尾静脉移植,BMSCs组+中药组予复方苦参汤灌胃干预,流式细胞术检测大鼠外周血Treg表达,ELISA检测大鼠血清TNF-a表达,Western blot检测细胞质及细胞核NF-κBp65表达,RT-PCR检测大鼠肠黏膜Foxp3mRNA TNF-αmRNA的表达。结果：1、和空白组相比,PBS组外周血Treg比率明显下降;干预后,和PBS组相比,BMSCs和二联组Treg比率上升(P<0.05)。2、和空白组相比,PBS组Foxp3mRNA表达明显上升;干预后,和PBS组相比,BMSCs和二联组Foxp3mRNA表达下降(P<0.05)。3、和空白组相比,PBS组胞质及胞核NF-k Bp65表达升高；干预后,和PBS组相比,BMSCs和二联组胞质及胞核NF-k Bp65表达下降(P<0.05)。4、和空白组相比,PBS组TNF-a表达升高；干预后,和PBS组相比,BMSCs和二联组TNF-a表达明显下降(P<0.05)。结论：BMSCs可以有效缓解溃疡性结肠炎,机制可能与BMSCs重新调配外周血和肠黏膜之间的Γreg比例,以及调控NF-kB介导的促炎反应相关,同时复方苦参汤起到协同作用。