松针有效成分的分析与鉴定

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以广西优势资源松针为原料,采用水蒸气蒸馏—浸提联合的方法提取松针有效成分,通过单因素实验和正交实验考察松针料液比、松针粒度、浸泡时间和提取时间对有效成分提取率的影响。由正交实验L9(43)结果表明,松针有效成分提取最佳工艺条件为:松针料液比为1:9,粒度为40-80目,浸泡时间为7h,提取时间为3h,对其提取物挥发油及莽草酸进行分析测试,为松针的开发利用提供理论依据和实践经验。   采用DB-5ms(30mx0.32mmx0.25um)及DB-1(30mx0.25mmx0.25um)石英毛细管柱分别对马尾松和湿地松松针挥发油进行了气相色谱-质谱(GC-MS)分析,柱温为三阶程序升温:60℃(lmin)20c/min80℃30c/min150℃6℃/min》260℃(5min)结果表明,从广西柳州产马尾松松针挥发油中分离出96种化学成分,鉴定了其中的35种成分;从湿地松松针挥发油中分离出133种化学成分,鉴定了其中的38种成分。两树种松针挥发油的主要化学成分大致相似,但在含量上有较大差别。马尾松松针挥发油中a-蒎烯的含量约为湿地松的3倍,而B-蒎烯含量后者是前者的1.29倍。比较了DB-5与DB-1石英毛细管柱的分离效果,结果表明DB-5较好。   采用萃取法(萃取剂主要用正丁醇)和柱层析分离法(大孔吸附树脂用DiaionHP-20)分离纯化松针浸提液中的莽草酸,利用高效液相色谱法(HPLC)和紫外可见分光光度法(UV-Vis)分别测定莽草酸含量。HPLC法分析条件:AlltimaNH2色谱柱(5um,4.6mmxl50mm):流动相为乙腈:2%H3P04(90:10,V:V);流速lmL/min;测定波长213nm:柱温25℃或30℃。紫外可见分光光度法测定莽草酸所用检测波长为213nm。建立的HPLC测定方法显示,莽草酸在0.33~2.88ug范围内与其峰面积积分值呈良好的线性关系(R2大于0.999),湿地松松针含量达69.84mg/g,松针水提后经萃取处理得莽草酸含量:达38.55%;经柱层析处理得莽草酸含量达78.38%。UV-Vis测定方法显示,莽草酸在4.7~23.Oug范围内与其峰面积积分值呈良好的线性关系(R2大于0.999),湿地松松针浸提后经层析柱处理得莽草酸含量达69.47%,与HPLC测定方法比较偏差为11.37%。
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