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近年来,细菌耐药性迅速发展,多重耐药菌频繁出现,成为威胁世界公共卫生安全的问题之一。多种耐药基因可通过质粒在不同来源细菌之间广泛传播,对人类和动物的健康造成潜在威胁。食品动物作为耐药菌重要的“储存库”,可将耐药基因通过食物链传播至人。为探究国内食品动物源大肠杆菌中多种重要耐药基因及质粒的流行规律,以及药物使用政策调整对耐药基因流行分布和传播特征的影响,本文对安徽某肉鸡场2013年～2018年分离的大肠杆菌中Inc HI2、Inc FⅡ、Inc I2、Inc I1和Inc X4质粒及bla CTX-M、fos A3、rmt B和mcr-1基因的流行特征进行研究,为动物源细菌耐药性监测及合理用药提供参考依据。本研究以2013年～2018年从安徽某肉鸡场分离的552株大肠杆菌为研究对象,采用PCR方法检测Inc HI2、Inc FⅡ、Inc I2、Inc I1及Inc X4质粒和bla CTX-M-1G、bla CTX-M-9G、fos A3、rmt B和mcr-1等耐药基因,结果显示Inc HI2、Inc FⅡ、Inc I2、Inc I1和Inc X4质粒在大肠杆菌中的检出率分别为32.61%（n=180）、26.63%（n=147）、26.45%（n=146）、6.25%（n=36）和2.54%（n=14）。2013年～2018年,Inc HI2质粒检出率在20.48%至46.67%之间波动,Inc FⅡ质粒检出率从8.70%上升至43.85%,Inc I2质粒检出率则从47.25%下降为19.23%,Inc I1和Inc X4质粒只在2105和2016年检出率较高,其他年份检出率分别低于10%和5%。bla CTX-M、fos A3、rmt B和mcr-1基因的检出率分别为78.8%（n=435）、54.17%（n=299）、20.29%（n=112）和35.68%（n=197）。6年间,bla CTX-M检出率在70%～94%之间波动,fos A3基因检出率从83.52%下降为21.54%,rmt B检出率由6.59%逐渐上升至31.54%,mcr-1基因检出率整体呈下降趋势,2017年～2018年下降尤为明显。采用PCR的方法,对mcr-1基因侧翼进行分析并且确定mcr-1基因位于何种质粒型中。共发现4种不同的基因环境,其中87株菌仅在mcr-1基因上游检测到插入序列ISApl1,23株菌在mcr-1基因上下游均检测到ISApl1,5株菌在mcr-1基因上游检测到完整的ISApl1,下游检测到不完整的ISApl1,114株菌在mcr-1基因上下游均未检测到ISApl1。197株mcr-1阳性菌中有192株mcr-1基因位于Inc HI2、Inc I2和Inc X4质粒上。2017年～2018年,mcr-1-Inc X4逐渐消失,mcr-1-Inc HI2也呈现降低趋势,mcr-1-Inc I2则呈现上升趋势。从197株mcr-1阳性大肠杆菌中挑选不同年份、不同质粒型和不同基因环境的72株进行接合转化实验,获得了61株接合转化子,其中Inc HI2、Inc I2和Inc X4质粒分别为18、38和5株。接合子进行S1-PFGE实验,结果显示所有接合转化子均为单质粒,Inc HI2质粒大小为210.0～310.0 kb之间,Inc I2质粒大小为54.7～78.2 kb之间,Inc X4质粒大小约为33.3 kb。琼脂稀释法检测61株接合/转化子对15种抗菌药的敏感性,黏菌素用微量稀释法检测,结果显示所有接合/转化子黏菌素最小抑菌浓度（Minimum Inhibitory Concentration,MIC）在2～16μg/m L之间,对氨苄西林和头孢噻肟的耐药率高于40%,对磷霉素和氟苯尼考的耐药率在20%～30%之间,对头孢他啶、庆大霉素和新霉素的耐药率在10%～20%之间,对多西环素、四环素和复方新诺明的耐药率均低于10%,61株接合/转化子对头孢西丁、阿米卡星、亚胺培南和环丙沙星均敏感。采用PCR方法检测接合/转化子中其他耐药基因的携带情况,1株Inc X4接合子携带bla CTX-M-14,10株Inc I2质粒携带bla CTX-M-64（n=3）、bla CTX-M-55（n=6）或bla CTX-M-132（n=1）,其余Inc X4和Inc I2接合/转化子均不携带其他耐药基因。Inc HI2接合子中有17株同时携带bla CTX-M-14、fos A3和flo R基因,其中分别有4株、3株和1株接合子还携带tet A、oqx AB和bla CTX-M-15,说明Inc HI2质粒中mcr-1常与其他耐药基因共传播,介导多种抗生素耐药。综上所述,该肉鸡场大肠杆菌中多种耐药基因和质粒广泛传播,其中mcr-1基因主要通过Inc HI2、Inc I2、Inc X4质粒在该养殖场中传播,且mcr-1-Inc HI2质粒通常同时携带多种耐药基因。值得关注的是,2017年～2018年mcr-1基因的流行分布和传播特征均发生了显著的变化,这可能与我国自2017年起禁止使用黏菌素作为饲料添加剂有关。因此,我们应规范养殖场中药物的使用,并且加强对细菌耐药性的监测,保障人类的健康及畜牧业的可持续发展。