【摘 要】
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目的:通过RT-PCR法及免疫组化法研究在脊髓缺血再灌注后不同时段的热休克蛋白27(HSP27)mRNA及蛋白的表达情况,进一步阐述热休克蛋白27的生物学特性在脊髓缺血再灌注机体组织
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目的:通过RT-PCR法及免疫组化法研究在脊髓缺血再灌注后不同时段的热休克蛋白27(HSP27)mRNA及蛋白的表达情况,进一步阐述热休克蛋白27的生物学特性在脊髓缺血再灌注机体组织中的保护性机制。方法:实验于2006年7月—9月于福建中医学院中西医结合研究院实验室完成。SD大鼠48只,雌雄不限,体重180—320g,平均230g。随机分为正常对照组、缺血再灌注0、1、2、4、8、12、24 h组(n=6)。采用Zivin等的方法制备脊髓缺血再灌注模型。缺血30min再灌注一定时间后(0、1、2、4、8、12、24h),用4%多聚甲醛行灌注固定。切除L3-4双侧椎板,充分显露L3-4节段硬膜囊,切断周围神经根,将同一节段脊髓取出。采用RT-PCR反应体系及免疫组化法检测不同时间段HSP27mRNA及HSP27蛋白表达情况。结果:48只SD大鼠均进入结果分析。①缺血再灌注后HSP27mRNA与HSP27蛋白表达随即升高,各缺血再灌注组与正常对照组均有显著性差异(P＜0.05)。②缺血再灌注0、1h、211、12h、2,1h组之间无显著性差异(P＞0.1)。③缺血再灌注4h与8h组HSP27mRNA与HSP27蛋白表达为最高与其余缺血.再灌注组有显著性差异(P＜0.05),缺血再灌注4h与8h组间mRNA与HSP27蛋白表达无显著性差异(P＞0.1)。结论:脊髓缺血再灌注后HSP27mRNA与HSP27蛋白表达均随再灌注的时间延长而升高,到4h与8h表达量达最高峰。后随着再灌注时间的推移而降低,但仍与正常对照组之间有显著性差异。
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