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目的：颞下颌关节骨关节炎(temporomandibular joint osteoarthritis, TMJ-OA)是一类较严重的颞下颌关节紊乱病(temporomandibular disorders, TMD)。 TMJ-OA的病因目前尚未完全阐明。本课题目的是探讨慢性睡眠紊乱(Chronic sleep disturbance CSD)与TMJ-OA的关系,明确血管新生是否存在于TMJ-OA中,以及调控血管新生的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF), Delta-like 4 (D114)以及磷酸化的细胞外调节蛋白激酶1/2(phosphated extracellular regulated protein kinases, p-ERK1/2)的表达水平的变化,明确D114和p-ERK1/2的表达有无相关性。方法：将180只雄性Wistar大鼠随机分为3组：对照(CON)组,慢性睡眠紊乱(CSD)组,恢复(R)组,每组60只。每个大组分别分为3个亚组：4周(4w)组、6周(6w)组、8周(8w)组,每个亚组20只大鼠。采用改良多平台法(modified multiple platform method, MMPM)建立大鼠慢性睡眠紊乱模型。测定大鼠血清中皮质酮(corticosterone, CORT)和促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone, ACTH)的水平,评估大鼠慢性睡眠紊乱模型建立的效果；HE染色法观察大鼠TMJ的结构变化；通过CD105免疫荧光法及毛细血管密度(microvessel density, MVD)计数法来评估大鼠颞下颌关节软骨血管新生情况；应用免疫组化、Western blot和RT-qPCR测定髁突软骨VEGF, D114和p-ERK1/2的表达水平。体外分离培养大鼠髁突软骨细胞(mandibular condylar cartilage cells, MCC cells),应用外源性VEGF和p-ERK1/2的特异性阻滞剂U0126对生长的髁突软骨细胞进行干预,明确D114和p-ERK1/2的表达有无相关。结果：我们应用改良多平台法成功地建立了大鼠慢性睡眠紊乱模型。CSD能够引起大鼠血清中CORT和ACTH浓度升高。与CON组相比,CSD组大鼠的ACTH和血清CORT的表达量均出现明显增加(p<0.05)。HE染色结果显示,CON组大鼠TMJ结构正常；而CSD组和R组大鼠的TMJ均出现明显的TMJ-OA病理改变。通过软骨损害评分发现：CSD组和R组得分明显高于CON组(p<0.01)：同时与CON组相比,CSD组和R组出现软骨损害的大鼠数量也显著增加(p<0.05)。大鼠TMJ免疫荧光及HE染色结果显示：CSD组和R组大鼠TMJ髁突骨软骨交界及软骨内出现新生血管,有部分血管完全位于软骨内。CSD组及R组的MVD显著高于CON组(p<0.05)。免疫组织化学结果显示：CON组无或极少出现免疫阳性结果,而CSD组和R组VEGF,D114和p-ERK1/2均出现明显免疫阳性结果。Western blot结果也表明：与CON组比较,CSD组和R组髁突软骨VEGF, D114和]>ERK1/2的蛋白表达均明显升高；RT-qPCR结果证实：VEGF和Dll4的mRNA转录水平也都明显升高(p<0.05)。细胞学实验发现,髁突软骨细胞中VEGF激活D114是依靠p-ERK1/2的活化来实现的。当MCC细胞经过U0126处理后,Western blot检测到p-ERK1/2表达被抑制,而D114的表达水平也出现了相应的降低。结论：本课题揭示了经历了长期的慢性睡眠紊乱大鼠的TMJ的病理变化,证实了CSD能够引起大鼠出现TMJ-OA.髁突软骨血管新生是TMJ-OA的发生发展的重要因素。同时髁突软骨细胞中调控血管新生的关键因子VEGF, D114和p-ERK1/2的表达水平上调,VEGF通过活化p-ERK1/2来上调D114的表达,从而促进TMJ的软骨血管新生。