JNK通路相关因子在间歇性低氧大鼠胃黏膜的表达及褪黑素的干预作用

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目的通过建立间歇性低氧模型模拟呼吸睡眠暂停,探讨间歇性低氧所致胃黏膜病变与JNK通路相关因子表达的内在联系,研究间歇性低氧对大鼠胃黏膜的损伤及其机制,并进一步研究褪黑素的干预作用,从而为临床防治OSA相关胃黏膜病变提供理论依据。方法选取成年清洁雄性Wistar大鼠48只,按体重随机分成3组:正常对照组(NC组)、间歇性低氧组(IH组)及褪黑素组(MT组)(n=16),持续造模8周,每天8:00将MT组、IH组放入低氧箱中,给予间歇性低氧7小时,同时将NC组放入与低氧箱相同的塑料试养箱中,给予间歇性压缩空气7小时。分别在2w、4w、6w、8w每组随机选取4只大鼠处死。肉眼及光镜下观察大鼠胃黏膜组织的大体形态及病理学形态,用pH探针检测胃液pH值,采用ELISA检测胃组织胃蛋白酶及氧化应激指标ROS、MDA、SOD水平,采用免疫组织化学法观察胃黏膜组织JNK、p-JNK、Bax、Bcl-2蛋白表达水平,采用Real-time PCR法定量检测大鼠胃黏膜细胞JNK mRNA、Bax mRNA、Bcl-2 mRNA水平。结果1肉眼下NC组胃黏膜组织未见明显损伤,IH组和MT组胃黏膜出现不同程度出血、糜烂及溃疡,随着时间的延长损伤越严重,与IH组比较,MT组胃黏膜的损伤减轻。光镜下见NC组胃黏膜未见病理学改变,IH组和MT组可见胃黏膜组织固有层中不同程度的炎细胞浸润,胃腺周围出血、胃腺结构破坏,边界不清,随着时间延长上述改变越明显,与IH组比较,MT组胃黏膜组织病理学改变减轻。2与NC组比较,IH组和MT组胃液pH明显下降,随着时间延长下降越明显(P<0.05),与IH组比较,MT组胃液pH值明显升高(P<0.05)。与NC组比较,IH组和MT组胃组织胃蛋白酶水平明显升高,随着时间延长升高越明显(P<0.05),与IH组比较,MT组胃组织胃蛋白酶水平明显下降(P<0.05)。3与NC组比较,IH组和MT组胃组织ROS、MDA含量均明显升高,随着时间延长升高得越明显(P<0.05),与IH组比较,MT组胃组织ROS、MDA含量明显降低(P<0.05)。与NC组比较,IH组和MT组胃组织SOD水平下降,随着时间延长下降得越明显(P<0.05),与IH组比较,MT组胃组织SOD水平明显升高(P<0.05)。4与NC组比较,IH组和MT组胃黏膜JNK、p-JNK蛋白平均光密度值均明显升高,随着时间延长升高越明显(P<0.05),与IH组比较,MT组胃黏膜组织JNK、p-JNK蛋白平均光密度值明显下降(P<0.05)。与NC组比较,IH组和MT组胃黏膜Bax蛋白平均光密度值明显升高,Bcl-2蛋白平均光密度值明显下降,随着时间延长改变越明显(P<0.05),与IH组比较,MT组胃黏膜Bax蛋白表达水平下降,Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05)。5与NC组比较,IH组和MT组胃组织JNK mRNA表达水平均明显升高,随着时间延长升高越明显(P<0.05),与IH组比较,MT组胃组织JNK mRNA表达水平明显下降(P<0.05)。与NC组比较,IH组和MT组胃组织Bax mRNA表达量明显升高,Bcl-2 mRNA表达量明显下降,随着时间延长改变越明显(P<0.05),与IH组比较,MT组胃黏膜Bax mRNA表达量明显下降,Bcl-2 mRNA表达量明显升高(P<0.05)。结论1间歇性低氧可使胃黏膜氧化应激(ROS、MDA含量增加)与抗氧化应激(SOD水平下降)系统失衡、胃黏膜分泌功能紊乱(PH值下降、胃蛋白酶水平升高)、胃黏膜JNK通路激活(JNK、p-JNK、Bax表达增加、Bcl-2表达下降)、胃黏膜损伤。2褪黑素能抑制间歇性低氧大鼠胃黏膜的氧化应激(ROS、MDA水平下降、SOD水平升高)、改善胃黏膜分泌功能(PH值升高、胃蛋白酶水平下降)、抑制胃黏膜JNK通路(JNK、p-JNK、Bax表达降低、Bcl-2表达增加)、减轻胃黏膜损伤。图18幅;表13个;参117篇。
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