论文部分内容阅读
中药类兽药通过提高机体免疫力从而起到防病治病的目的，具有低毒，无残留的特点，可以在抗生素类药物的休药期作为替代药物使用。但目前市场上的中兽药剂型少、剂量大、成本高，因此其在畜牧业中的应用受到限制。而中药经过发酵后，不仅可以增加有效成分溶出，还可以改变其有效成分，使之产生新的性味，从而达到增加功效，降低剂量等目的。本论文系统研究了以黄芪为主要原料的灵芝固态发酵、灵芪菌质有效成分提取和菌质提取液功效评价，结果表明：
1.黄芪经过50min不同温度湿热灭菌处理后，黄芪多糖和黄酮含量无显著变化，皂甙含量随处理温度升高而降低，但105℃时黄芪皂甙含量与对照差异不显著。因此药性基质的灭菌条件为105℃、50min。
2.灵芝菌丝体DNA含量不随培养时间、培养基组成和培养条件的变化而改变，并且黄芪和麸皮对灵芝DNA含量测定无影响。表明灵芪菌质DNA含量可衡量灵芝生物量。
3.比较液态和固态时黄芪与灵芝发酵作用，表明液态发酵时，添加量大于1.5％时黄芪对灵芝的生长有明显的抑制作用。固态发酵时，黄芪对灵芝生长的抑制程度与培养基中黄芪含量无显著关系。确定采用黄芪含量为50％的固体培养基进行发酵。
4.优化得到灵芝与黄芪的固态发酵条件为：固体培养基黄芪含量为50％，发酵时间30d，接种量15％，物料厚度为3cm，起始含水量55％，起始pH自然，发酵温度30℃，相对湿度70％。
5.对药性基质和灵芪菌质的HPLC分析表明：药性基质经过发酵后其成分发生了明显变化。
6.优化得到灵芪菌质多糖提取的最佳条件为：提取温度90℃，提取时间100min，料液比1:20，提取3次，沉淀多糖添加乙醇终浓度至75％；优化得到灵芪菌质皂甙提取的最佳条件为：提取液乙醇浓度80％，料液比1:25，提取时间120min，提取2次。优化后的灵芪菌质多糖和皂甙得率分别为59.78 mg/g和1.14mg/g。
7.比较黄芪与灵芝发酵前后不同提取液对CEF单层的最大安全浓度，表明各提取液对CEF单层的安全浓度均变大，不同灵芪菌质不同提取液的最大安全浓度差别不显著。黄芪和菌质提取液最大安全浓度分别为：水提液50和200μg·mL-1，多糖溶液800和1600μg·mL-1，醇提液20和100μg·mL-1。
8.比较黄芪和灵芪菌质不同提取液对禽流感减毒病毒的抑制效果，其中灵芪菌质水提液对病毒的抑制率最大。比较不同加入方式对病毒抑制作用，以先加提取液后感染病毒的抑制效果最佳。以黄芪含量50％的灵芪菌质C水提液对病毒的抑制率最高。