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大多数哺乳动物排出的卵子的发育阻滞在第二次减数分裂中期,并且只有在精子穿入或者人工激活刺激的条件下如孤雌激活才能完成整个减数分裂。如果第二次减数分裂中期阻滞的卵子不能在适当的时间内与精子结合,卵母细胞内就会发生一系列的衰变,我们称这一过程为卵母细胞的老化。哺乳动物卵母细胞在老化过程中发生了卵子极性的丢失,主要体现在肌动蛋白帽的破坏上。卵母细胞成熟过程中卵子极性的丢失将会导致多精入卵发生频率增加,从而致使受精过程的失败。 目前为止,卵母细胞老化过程中卵子极性破坏的分子机制尚不清楚。Arp2/3 complex,JMY,WAVE2是三种非常重要的肌动蛋白成核因子,在体细胞有丝分裂过程中它们能够促进新形成的肌动蛋白丝的生长,同时参与细胞的迁移与吸附,细胞的内吞作用及细胞极性的建立。本研究的目的是探究肌动蛋白成核因子是否与卵母细胞老化过程中卵子极化的丢失有关。 我们研究了三种成核因子Arp2/3 complex,JMY,WAVE2分别在第二次减数分裂中期的小鼠卵母细胞与老化的小鼠卵母细胞中的表达与定位,采用共聚焦免疫荧光染色和实时荧光定量RT-PCR的方法,实验结果表明在老化的卵母细胞此三种成核因子的蛋白水平表达与mRNA水平表达均明显下降。然而,卵母细胞在体外老化的过程中经咖啡因处理后,Arp2/3 complex,JMY,WAVE2的表达与对照组无明显差异。综上所述,本研究证实了小鼠老化卵母细胞皮质极性的丢失可能由于肌动蛋白成核因子的表达减少所致。