研究目的膝骨性关节炎(OA)是中老年常见的慢性、进展性疾病。近年来,伴随着世界老龄化人口的增加,其发病率呈逐年上升的趋势。目前,尚缺乏根治的方法。祖国医学将本病归入“骨痹”的范畴,瘀血阻络是主要病机,活血通络是治疗本病的重要方法。而在西医病理方面,IL-1与膝OA关系密切,尤其是IL-1β,研究表明抑制或减少IL-1β产生的药物能够缓解膝OA的症状,减缓膝OA进展。关节镜下关节清理具有有创伤小、恢复快、简单、安全、疗效确切的特点。因此,在本课题中,采用在关节镜下关节清理术基础上联合活血通络凝胶外用治疗本病,观察其临床疗效及对患者血清、关节液IL的影响。同时,研究活血通络凝胶对兔软骨自由基、IL-1βmRNA、免疫组化等多方面的影响,从细胞因子角度分析活血通络中药外用治疗膝OA的可能机制,为膝OA的治疗研究提供全新的实验数据和思路。研究方法1.临床研究96例患者随机分为对照组和治疗组。治疗组在关节镜下关节清理术基础上,给予活血通络凝胶外用,每次1g,以覆盖患膝为度,每日1次,2周为1疗程,间隔2天,进入下一疗程,总疗程为3个月；对照组仅给予关节镜下清理术。两组病例根据Lequesne的OA严重性和活动性指数评估方法,制定膝OA观察表进行计分,总分共16分,分为以下5个等级：16分～13分,12分～9分,8分～5分,4分～1分,0分。治疗后达到0为临床治愈,进步2个等级为显效,进步1个等级为有效,<1个等级为无效；并于术中和疗程结束后1个月抽取外周血与膝关节滑液,-20℃保存,分批集体检测,采用ELISA双抗体夹心法测定其中IL-1含量。2.实验研究75日龄日本大耳白兔50只,采用改良的Hulth法造模。随机分为空白组、模型组、治疗组,其中模型组30只,其余每组10只。除空白组外,其余40只家兔均进行造模。于造模后1周开始进行治疗,采用1兔1笼喂养。模型组常规饲养；治疗组给予活血通络凝胶局部涂抹,0.1g／次,覆盖患膝为度,1次／日,4周为1疗程,共3个疗程。疗程结束后,先从每只家兔耳缘静脉采血3ml,再进行空气栓塞处死动物,以锐利刀片切取膝关节正中的部分软骨组织。分别进行血清SOD、LPO检测,软骨含水量、己糖醛酸和羟脯氨酸检测,软骨及滑膜中IL-1βmRNA表达与IL-1β含量测定。研究结果1.临床研究治疗组总有效率为93.6%,对照组有效率为83.7%,治疗组优于对照组,P<0.05,有显著性差异。两组血清和关节液中IL-1含量明显降低,治疗组与对照组比较,优于对照组,P<0.05,有显著性差异。2.动物实验本实验采用Hulth法在8周时建立了兔膝OA模型。IL-1β表达在第8周时达到高峰,随后逐渐降低,而IL-1βmRNA初期升高后呈逐渐下调趋势。治疗后模型组血清SOD含量升高,与模型组比较,P<0.05,具有显著性差异；血清LPO含量明显降低,与空白组比较,P<0.01,有显著性差异；治疗组软骨含水量含水量低于模型组,P<0.05,具有显著差异,治疗组己糖醛酸含量与羟脯氨酸含量高于模型组,P<0.01,具有显著差异。IL-1βmRNA表达明显降低,与模型组比较,P<0.05,差异有显著性意义。IL-1β免疫组化灰度值表达也明显降低,与模型组比较,P<0.01,差异有非常显著性意义。结论在关节镜下关节清理术的基础上,辅以外用具有活血通络作用的活血通络凝胶治疗膝关节骨性关节炎取得良好疗效,活血通络凝胶在术后起到明显的协同作用。本疗法具有创伤小、恢复快、简单、安全、易于坚持等优点；同时通过降低IL-1的含量,可以有效的减缓软骨的退化,延缓人工关节置换的时间；明显的减轻患者的痛苦和经济负担,提高他们的生活质量。采用Hulth建立了兔膝OA模型,IL-1β表达在第8周时达到高峰,随后逐渐降低,而IL-1βmRNA初期升高后呈逐渐下调趋势。可能与早期创伤性反应有关,随着创伤的愈合,而表达逐渐下降。但在造模第12周时,X线显示骨性关节炎晚期的表现,不适合于OA早中期的研究。因此对于早中期膝OA防治的研究,宜选择术后8周的OA模型进行实验。活血通络凝胶通过降低软骨中IL-IβmRNA表达、降低关节局部及全身IL-1含量,阻止软骨组织进一步损伤。有效改善兔膝OA模型患膝氧自由基代谢以及软骨生化,提高抗氧自由基的作用,减少氧自由基对膝关节软骨的损伤,促进软骨修复。