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前言 近50年来肺癌的发病率和死亡率明显上升，对其进行准确诊断和治疗是当今医学生物学关注的热点。肿瘤的发生是涉及癌基因的激活和癌基因和抑癌基因的失活的多基因改变的多阶段过程。目前常见的抑癌基因失活是p53和p16／INK4a基因突变。p53基因既可负向调节细胞周期，又可调控细胞凋亡。p53基因突变与恶性肿瘤组织学类型、组织分级及淋巴转移是否有关，众多研究结果不甚一致，致使应用p53蛋白在肺癌中的表达水平来辅助判断肺癌预后时受到限制。本实验将就p53蛋白在肺癌中表达与肺癌组织学类型、组织分级及淋巴转移的关系提出自己的实验结论。 最近证实p16／INK4a基因位点还存在另一种不同的阅读框ARF，此位点是目前唯一被发现的包含两个重叠基因的位点，并且每一个基因都有自己独立的启动子。“人类P19ARF蛋白”可通过与Mdm2结合从而降低Mdm2对p53的降解作用，间接升高了P53的浓度，最终达到抑癌作用。作为新发现的抑癌基因，p19ARF与肺癌的发生及其组织学类型、组织分级及淋巴转移的关系尚待研究。本实验应用免疫组化方法来探讨p19蛋白及突变型p53蛋白与肺癌的发生及其组织学类型、组织分级及淋巴转移的关系，同时检验p19蛋白与突变型p53蛋白的表达是否相关，有助于肺癌的诊断及判断其预后。 实验材料及方法 32例肺癌及8例正常肺组织标本来自中国医大二院病理科门一2000介石蜡切片厚度为 4pm。 一抗p19鼠抗人单克隆抗体及即用型SP试剂盒（武汉博士德公司，二：”入 一抗 p53鼠抗人单克隆抗体及即用型 SP试剂盒＊京中山公司，1：so）； 石蜡切片常规HE染色进行组织学认定后，用免疫组化S－P法分别检测n 蛋白及P53蛋白在组织中的表达。 实验结果 P53蛋白在32例肺癌组织中阳性表达率为45．78％，而在8例正常肺组织中均无表达，经统计学处理二者相比差异显著h＜0．01厂在非小细胞肺癌中平均阳性表达率为 44．06％，在小细胞肺癌中阳性表达率为75．0％，二者相比均差异显著（p＝0．029＜0．05厂在肺癌高分化组中阳性表达率为48．89％，在中分化组中阳性表达率为44．54％，在低分化组中阳性表达率为48．57％，三组间差异显著差异无显著性肿＞0．05人在伴胸内淋巴结转移的肺癌组织中阳性表达率为56．67％，而在不伴胸内淋巴结转移之肺癌组织中P19蛋白阳性表达率为43．27％，二者之间相比差异无显著性（P＝0．558＞0．05）。 P19蛋白在32例肺癌组织中阳性表达率为1．gi％，而在8例正常肺组织中为 21。88％，经统计学处理二者相比差异显著k＝0．02＜O．05人在非小细胞肺癌中平均阳性表达率为2．16％，在小细胞肺癌中阳性表达率为0．24％，对比差异显著h＝0．02＜0． ·2·05人在肺癌高分化组中阳性表达率为 3．89％，在中分化组中阳性表达率为2．25％，在低分化组中阳性表达率为1．25％，三组间差异显著。在伴胸内淋巴结转移的肺癌组织中阳性表达率为0，20％，而在不伴胸内淋巴结转移之肺癌组织中… 蛋白阳性表达率为2．39％，二者之间相比均差异显著h一队012＜0．05厂 P19蛋白与 P53蛋白在肺癌中表达呈负相关门一一2．983X＋55．497 r＝0．366 rz＝0．134 p＝0．04＜0．05）。 讨 论 目前公认的较重要的抑癌基因有P53和INK家族。P53基因编码的野生型PS 3蛋白，即tP53，在正常情况下半衰期短，只有20－30分钟，且稳定性差，不易测到，突变后的P53蛋白构象发生改变，稳定性增加，半衰期延长为20－40小时，故临床测到的P53蛋白是突变型p53蛋白，即mtt53蛋白。研究发现大多数肿瘤有p53蛋白突变一3蛋白在细胞周期 G名过程中起关键性负调控作用，能使细胞滞留在GI后期，使细胞得以修复DNA损伤的机会，如果细胞不能成功修复DNA损伤或有效对抗外界因素干扰，则胞内自杀防御系统（凋亡）被激活，细胞凋亡成为p53保护整体细胞不受进一步损伤的主要防御功能。本研究通过应用SP免疫组化方法研究p53蛋白在肺癌中的表达，发现p53蛋白在肺癌组织中的表达明显高于正常肺组织，差异显著，且在小细胞肺癌中的表达低于在非小细胞肺癌中的表达，差异显著，与组织分化程度及淋巴结转移无明显关系，此结果与多数学者研究结果相符。 1995年办ll等在研究P16八NK4a基因位点时发现其还存在另一种不同的阅读框ARF，在小鼠A邵基因编码的蛋白产物为P19见蛋白，因此编码P16f19蛋白基因位点被称为INH／ARF位点。INH／ARF位点的特殊性在于它是目前唯一被发现的包含两 ·3·个重叠的基因的位点，并且每一个基因都有自己独立的启动于，他们的转录相对独立，P19＾”蛋白在鼠胚胎成纤维细胞中过度表达，分子量为19KD，能诱导细胞周期停滞于Q期，它在人类的同源物被称为“人类p19“”蛋白”，但编码蛋白的分子量为 14KD，亦称pl4W蛋白，目前尚未?