侵袭性牙周炎临床疗效观察及龈下菌群分析

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目的:   本研究通过统计学方法分析现阶段牙周非手术治疗对侵袭性牙周炎的短期治疗效果,并设计细菌16S rRNA通用引物及常见牙周可疑致病菌的特异引物,扩增侵袭性牙周炎不同类型骨吸收位点的全细菌及牙龈卟啉单胞菌、齿垢密螺旋体、福赛坦氏菌和伴放线放线杆菌,进而研究特异性细菌与骨吸收类型的关系。   材料与方法:   1、研究对象   随机选取2010年9月至2012年12月在中国医科大学口腔医院牙周科门诊确诊为侵袭性牙周炎的患者42例,其中男性16例,女性26例。年龄19~34岁,平均30.6±1.2岁。纳入标准:①无血液、内分泌、甲亢等全身系统性疾病;②妇女非妊娠期,未服用避孕药;③近半年未做过牙周治疗,近3个月未服用过抗生素;④不抽烟;⑤无明显咬合异常,无正畸治疗史;⑥口内余留牙不少于25颗(含试保留牙);⑦参照1999年国际牙周病新分类的诊断标准均被诊断为AgP,且X光片显示有典型角形吸收牙位。签署知情同意书。   2、牙周临床指标检查   检查患者口腔中(第三磨牙不检查,只行治疗)的四个位点(近中、颊侧中央、远中、舌侧近中)的探诊深度(PD)、临床附着丧失(CAL)、全口天然牙(不包括第三磨牙)的出血指数(BI)、牙齿松动度(TM)。   3、样本采集   收集侵袭性牙周炎患者角形骨吸收牙位和非角形骨吸收牙位的龈下菌斑,置于1 mlPBS缓冲液的EP管中,-80℃冻存。   4、致病菌的检测   利用细菌基因组DNA提取试剂盒提取菌斑DNA,应用以16S rRNA为基础的聚合酶连反应(PCR)技术检测菌斑中牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonasgingivdis,Pg)、齿垢密螺旋体(Treponema denticola,Td)、福赛拟杆菌(Tannerellaforsythus,Tf)和伴放线放线杆菌(Aggregatibacter actinomycetemcomitans,Aa)的检出率,1.5%琼脂糖凝胶电泳检测结果,运用电泳凝胶成像分析软件(FlrorchemV2.0)分析各电泳条带的平均灰度值(AVG),计算各细菌的相对含量。   5、统计学分析   数据采用SPSS13.0软件进行分析,资料采用独立样本t检验,卡方检验进行统计学分析。显著水平:P<0.05时有显著性差异。   结果:   1、患者治疗后1、3、6个月的PD、CAL、BI、TM较治疗前均有明显降低。   2、Pg、Td、Tf在角形和非角形吸收位点均有较高的检出率,而Aa的检出率相对较低。   3、Pg、Td、Tf、 Aa在角形和非角形吸收位点之间的检出率差异没有明显统计学意义。   结论:   1、现阶段牙周非手术治疗对侵袭性牙周炎有良好的临床效果。   2、侵袭性牙周炎患者牙槽骨吸收形式与龈下菌群中Pg、Td、Tf、 Aa的种类差异无明显相关,可能跟龈下菌群中各可疑致病菌的相对含量的构成差异有关。
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