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心脏干细胞（Cardiac stem cells,CSCs）是心脏内具有增殖和分化能力的细胞，可分化为心脏细胞的三种谱系即心肌细胞、内皮细胞和平滑肌细胞。如何促进CSCs迁移并分化为心肌组织一直是再生医学研究领域的热点之一。目前已有研究发现心梗后梗死周边区大量炎症因子聚集，其中基质细胞衍生因-1（Stromal cell-derived factor1，SDF-1）和干细胞因子（Stem cell factor，SCF）能促进CSCs迁移至梗死区域；IL-6可以促进内源性心肌再生。IL-6促心肌细胞再生的作用是否与其对心脏干细胞的影响及调控有关，目前尚无报道。因此本课题拟研究炎症因子IL-6对CSCs增殖、分化及迁移的影响。 目的: 通过CCK-8细胞增殖assay、免疫组化以及transwell等方法分别研究IL-6对c-kit+CSCs增殖、分化以及迁移的影响，并阐明其机制，为进一步完善c-kit+CSCs在临床治疗心梗和心衰等疾病提供理论基础。 方法: 1.通过免疫组化追踪Brd U+细胞和CCK-8增殖assay等方法研究IL-6对c-kit+CSCs增殖的影响。 2.IL-6干预c-kit+CSCs后，通过Western Blot方法研究IL-6影响c-kit+CSCs的可能信号通路。 3.通过免疫组化技术和real time RT-PCR等方法研究IL-6对c-kit+CSCs分化的影响。 4.加入信号转导通路特异性抑制剂，抑制AKT、ERK和STAT3的磷酸化，重复CCK-8增殖assay以及免疫组化实验，观察IL-6影响c-kit+CSCs增殖及分化的可能机制。 5.通过transwell研究IL-6对c-kit+CSCs迁移的影响。 结果: 1.IL-6对c-kit+CSCs增殖的影响：IL-6（10、50、和100ng/ml）促进c-kit+CSCs增殖能力,具有统计学意义，但无明显的浓度依赖性；10ng/ml和50ng/ml IL-6不同程度地促进STAT3、ERK和AKT的磷酸化，100ng/ml IL-6不改变这三种蛋白质的磷酸化水平；溶解通路抑制剂的DMSO（0.1%）对细胞增殖无明显影响，10ng/ml IL-6的促增殖效应能被STAT3抑制剂STA21、ERK抑制剂FR180204或AKT抑制剂AZD-8835抑制（DMSO+STA21／FR180204／AZD-8835+IL-6组&DMSO+IL-6组）。 2.IL-6对c-kit+CSCs向心肌分化的影响：无IL-6干预，第一周时未观察到CSCs自发心肌分化，第二周与第四周仅有少量自发分化；不同浓度IL-6（10、50、和100ng/ml）干预1、2、4周，仅IL-610ng/ml组诱导c-kit+CSCs分化为Troponin I阳性细胞比率明显高于同时期对照组；DMSO对心肌分化无明显影响，10ng/ml IL-6的促c-kit+CSCs向心肌分化效应能被三种通路小分子抑制剂抑制（DMSO+STA21／FR180204／AZD-8835+IL-6组&DMSO+IL-6组）；10ng/ml IL-6干预c-kit+CSCs1或2周后，反应心肌细胞成熟的离子通道亚型Cav1.2和Kir2.1的表达量与空白对照组相比均下降。 3.IL-6对c-kit+CSCs向平滑肌分化的影响：无IL-6干预，1周、2周和4周的CSCs能自发分化出一定比例的平滑肌细胞；加入不同浓度IL-6（10、50、和100ng/ml）干预后，c-kit+CSCs两周内分化的α-SMA阳性细胞比率均高于同时期对照组；分化第四周与同时期对照组相比仅10ng/ml IL-6继续增加α-SMA阳性细胞比率，其他浓度IL-6组不影响阳性细胞率（50ng/ml）甚至降低阳性细胞率(100ng/ml)；然而DMSO基础上的IL-6并没有显示促平滑肌分化作用，c-kit+CSCs向平滑肌分化效应依然能被AKT和STAT3两种通路小分子抑制剂部分抑制（DMSO+STA21／AZD-8835+IL-6组&DMSO+IL-6组／DMSO组／空白对照组）。 4.IL-6对c-kit+CSCs迁移的影响：加入不同浓度IL-6（10、50、和100ng/ml）干预后，c-kit+CSCs迁移能力随着IL-6浓度的增高而增强。 结论: IL-6影响c-kit+CSCs的增殖、分化和迁移能力：低浓度10ng/ml IL-6可以稳定地促进c-kit+CSCs的增殖、分化和迁移能力，但同时抑制心肌细胞的成熟；高浓度长时间100ng/ml IL-6抑制c-kit+CSCs的分化。其促增殖和分化的信号通路与JAK/STAT、RAS/ERK和PI3K/AKT三种途径有关。这为提高使用c-kit+CSCs治疗心衰成功率的潜在目标提供了新的理论基础。