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本文化学合成了小鼠白细胞介素4(Interleukin 4，IL—4)基因，在大肠杆菌中成功地进行了克隆和表达，并对化学合成基因在大肠杆菌中的表达情况进行了分析，设计的基因序列特点为以后在真核细胞中表达奠定了基础，以期用基因工程手段来生产小鼠白细胞介素4，供其基础理论研究的需要。 实验将小鼠IL—4全基因的442碱基对(base-pair，bp)分为29个寡聚DNA片段，利用381A型DNA合成仪进行了全化学合成，设计的基因序列5’端带有Hind Ⅲ，EcoRI酶切位点和ATG起始码，3’端带有TAA、TAG两个终止码和HindⅢ酶切位点，有利于基因克隆操作。以基因中的Pstl酶切位点为界，用pUC12质粒作载体，将所有合成的DNA片段分前、后两组进行克隆，并转化大肠杆菌JM103，根据前、后两段基因序列的不同，选择了不同的克隆实验条件，得到了pUC12A和pUC12B两种重组克隆质粒，经DNA序列分析，肯定了pUC12A和pUC12B中所含的小鼠IL—4的前后两半基因片段的核苷酸序列完全正确。将pUC12A和pUC12B中所含的两个基因片段连接起来，插入到pUC12质粒中，得到了含小鼠IL—4全基因片段的重组质粒pFR101。 从pFR101质粒中切下小鼠IL—4基因片段，分别插入到pRC23，pSM43和pSM53三种不同的大肠杆菌表达质粒中，转化大肠杆菌TAP106，分别得到了TAP106(pFR102)，TAP106(pFR103)，TAP106(pFR104)和TAP106(pFR105)四种大肠杆菌克隆。经42℃诱导，提取四种细菌的总RNA，通过RNA打点杂交和Northern转移杂交，发现TAP106(pFR105)细菌中IL—4 mRNA的表达量最高，并在TAP106