果胶内切酶产生菌的筛选与发酵条件的研究

来源 :大连轻工业学院 大连工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nihaochaochao
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果胶酶是降解果胶物质的一类酶的总称,其中起主要作用的是果胶内切酶中的内切多聚半乳糖醛酸酶.果胶内切酶应用广泛,尤其是在果蔬汁及果酒的生产过程中,它能安全、高效地降解底物,使产品得以澄清.果胶内切酶普遍存在于植物和微生物中,但天然来源的果胶内切酶分泌量低且提取困难,难以满足现实实验、生产的需要.因此,筛选特定的微生物并应用其发酵以获取果胶内切酶是一种合理选择.本论文进行了果胶内切酶微生物菌种的筛选及其发酵条件的研究工作.从腐烂水果、果园泥土、大曲等中分离得到6株果胶酶产生菌.通过观察菌落形态和镜下形态,确定GJ-1为细菌,GJ-2为酵母,GJ-3和GJ-4为黑曲酶,GJ-5为青霉,GJ-6有待进一步确认.此结果同时证明了果胶酶微生物源的广泛性,细菌、酵母菌、霉菌等均能产果胶酶.其中,GJ-1是果胶内切酶高产菌株,根据菌株GJ-1的菌落形态和镜下形态及生理实验结果,确定GJ-1为芽孢杆菌属.对产果胶内切酶菌株GJ-1进行发酵培养,测定发酵液的酶活力.通过正交实验确定了适宜菌株GJ-1产酶的最佳培养基组成:p(麸皮)=30 g/L,ρ(NH<,4>)<,2>SO<,4>]=10 g/L,p(玉米粉)=20 g/L.果胶内切酶产生菌GJ-1的最适产酶条件:初始pH值为7.0,温度为30℃,时间为36 h.经硫铵沉淀和离子交换层析分离纯化,果胶内切酶被纯化了8.2倍,收率为4.7%.该酶最适反应温度为40℃,最适反应pH为5.0,该酶分子量为58 kDa.
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