论文部分内容阅读
目的： 探讨EGCG对6-OHDA单侧损毁帕金森病大鼠多巴胺能神经元的保护作用及可能机制。 方法： 将清洁级雄性SD大鼠31只，体重160～180克，随机分成3组，分别为对照组(NS+ NS)、模型组(6-OHDA+ NS)、EGCG干预组（6-OHDA+ EGCG）。造模前一周EGCG干预组每日给予腹腔注射EGCG溶液(剂量20mg/kg)，对照组及模型组每日腹腔注射等量生理盐水。一周后行脑立体定向注射，模型组及EGCG干预组于右侧MFB注射6-OHDA溶液（含0.02％VitC），对照组注射等量含0.02％VitC的生理盐水。造模后各组继续给予EGCG或生理盐水两周。造模后连续四周定期行阿朴吗啡(APO)诱导的旋转行为测试。造模后第四周末处死动物，分离中脑和纹状体待检。检测指标:(1)免疫组织化学法检测酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数。(2)高效液相色谱法测定各组大鼠双侧纹状体多巴胺(DA)含量。(3)双侧黑质区Perl's-DAB铁染色。 结果： 1.APO诱导的旋转行为 第四周时模型组平均转数（584.63±53.09转/30min）与对照组(0±0.00转/30min)相比，差异具有显著性(P＜0.01);第四周时EGCG干预组平均转数（402.88±56.61转/30min）较模型组降低，差异具有显著性(P＜0.01)，表明EGCG干预能减轻APO诱导的旋转行为。 2.TH免疫组化染色及阳性细胞计数 组内毁损侧与未毁损侧比较:对照组毁损侧TH阳性细胞数（1566.83±41.02个）与未毁损侧（1607.50±25.82个）相比，差异无统计学意义(P＞0.05);模型组毁损侧TH阳性细胞数（55.58±19.33个）与未毁损侧（1618.75±5.60个）相比，明显减少，差异具有显著性(P＜0.01); EGCG干预组毁损侧TH阳性细胞数（281.00±85.80）与未毁损侧（1617.13±15.82个）相比，明显减少，差异具有显著性(P＜0.01)。 组间毁损侧的比较:模型组毁损侧与对照组毁损侧相比，TH阳性细胞数明显减少，差异具有显著性(P＜0.01);EGCG干预组毁损侧与模型组毁损侧相比，TH阳性细胞数多，差异具有显著性（P＜0.01）。 3.HPLC测纹状体内DA含量 组内毁损侧与未毁损侧比较:对照组毁损侧纹状体DA含量（799.02±312.46ng/ml）与未毁损侧(812.07±324.59 ng/ml)相比，差异没有统计学意义（P＞0.05）;模型组毁损侧纹状体DA含量(55.58±19.33 ng/ml)与未毁损侧（907.37±483.50 ng/ml）相比，明显降低，差异具有显著性(P＜0.01);EGCG干预组毁损侧纹状体DA含量（107.25±31.90 ng/ml）与未毁损侧(921.94±481.70ng/ml)相比，明显降低，差异具有显著性(P＜0.01)。 组间毁损侧的比较:模型组毁损侧纹状体DA含量较对照组毁损侧明显降低，差异具有显著性(P＜0.01); EGCG干预组毁损侧纹状体DA含量较模型组毁损侧高，差异具有显著性(P＜0.01)。 4.黑质区perl's-DAB铁染色阳性反应平均光密度 组内毁损侧与未毁损侧比较:对照组毁损侧SN区铁染色阳性反应平均光密度（0.215±0.010）与未毁损侧（0.208±0.008）相比，差异没有统计学意义(P＞0.05);模型组毁损侧SN区铁染色阳性反应平均光密（0.361±0.023）较未毁损侧（0.209±0.009）高，差异具有显著性(P＜0.01);EGCG干预组毁损侧铁染色阳性反应平均光密（0.258±0.012）较未毁损侧（0.203±0.010）高，差异具有显著性(P＜0.01)。 组间毁损侧的比较:模型组损毁侧铁染色阳性反应平均光密较对照组毁损侧高，差异具有显著性(P＜0.01); EGCG干预组毁损侧铁染色阳性反应平均光密较模型组毁损侧低，差异具有显著性（P＜0.01）。 结论： 1.6-OHDA单侧损毁PD大鼠模型的建立是成功的。 2.在PD大鼠损毁侧SN内存在铁的异常沉积，铁在6-OHDA所致的DA能神经元毒性中可能起了一定的作用。 3.EGCG对6-OHDA单侧损毁PD大鼠多巴胺能神经元损伤具有保护作用，其中黑质区铁水平改变可能与之相关。