不同的动物种类将精子储存作为一种生殖策略,完成繁衍。一方面,精子储存在生殖道内,精子本身的结构构造利于精子储存。另一方面,精子接受生殖道上皮细胞分泌的营养物质,作为能量来源,还会带走其产生的代谢废物。同时,生殖道会为精子储存提供安全舒适的微环境,使其长期储存。可见,生殖道免疫系统与精子储存具有相关性。TLRs作为固有免疫系统的重要组成,其重要成员TLR2/4在抵抗感染,维持机体稳定方面意义重大。精子虽然作为雌性生殖道的外来物质,却能长期储存在生殖道内,推测TLR2/4在保护维持精子储存过程中发挥作用。然而,据我们所知,到目前并没有关于爬行类TLR2/4的报道。本文以雌性中华鳖为实验动物,通过观察冬眠期中华鳖输卵管不同部位TLR2/4表达与分布,探讨不同时期,TLR2/4与精子储存的相关性。实验Ⅰ:中华鳖输卵管的显微结构与超微结构与精子储存应用光镜和电镜技术,研究雌性中华鳖输卵管不通部位的显微结构,及输卵管上皮及分泌腺体的超微结构。中华鳖输卵管分为5部分:伞部,蛋白分泌部,峡部,子宫部和阴道部。与精子储存密切相关的是峡部,子宫部和阴道部。HE染色结果与电镜结果显示每一部分机构组成相似,包括上皮细胞层,固有层,粘膜下层,肌层,基底层。上皮细胞包括分泌细胞与纤毛细胞,固有层包括许多血管与大量的腺体,腺体开口于官腔,里面储存很多分泌颗粒。输卵管特殊的组织构造,为精子提供了适宜的储存场所。实验Ⅱ:中华鳖输卵管TLR2/4表达和分布及与精子储存精子进入中华鳖生殖道,与上皮发生互作,并长期储存于生殖道内。生殖道固有免疫系统可能在维持精子存活及其长期储存方面发挥重要作用。探究生殖道TLR2/4的表达与分布对深入理解精子储存的机理非常重要。本研究的目的是探究冬眠期(11月至次年4月),生殖道各个部位的TLR2/4蛋白与mRNA的表达及其蛋白的分布。免疫组化与荧光定量PCR分别探究TLR2/4蛋白和mRNA在生殖道蛋白部、峡部、子宫部和阴道部的分布与表达。结果显示,TLR2蛋白主要表达于生殖道上皮细胞,而TLR4蛋白广泛分布于生殖道,在上皮与腺体高表达。分析发现,TLR2/4蛋白与mRNA在峡部、子宫部和阴道部的表达高于蛋白部。生殖道11月TLR2蛋白与mRNA的表达高于4月,4月TLR4蛋白与mRNA的表达高于11月。这些结果预示TLR2/4表达可能保护精子免受病原微生物的感染。TLR2的作用可能会在精子储存的前期发生作用,相较于TLR2,TLR4可能在精子存储的晚期发挥功能。