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禽网状内皮组织增生症病毒(REV)是一种逆转录病毒,主要引起禽群严重的免疫抑制和肿瘤形成,目前尚无有效商品化疫苗或药物用以防控,对养禽业造成了严重的影响。TRIM62(tripartite motif containing 62)作为宿主的一种防御蛋白,在免疫相关信号通路和抗病毒免疫反应中发挥重要作用,是一种新的天然免疫调节因子。本实验室在前期的研究中,通过对感染REV的DF-1细胞进行蛋白组学分析,发现TRIM62表达量与病毒的复制量变化呈相反趋势,因此推测鸡TRIM62可能具有抑制REV复制的作用。已有研究报道显示,人TRIM62具有抑制逆转录病毒HIV复制的作用,鸡TRIM62对逆转录病毒复制的抑制作用未见报道。基于前期实验的数据以及TRIM62的生物学功能,我们设计本课题,探究TRIM62抗逆转录病毒REV复制的作用,为进一步深入研究其抗禽逆转录病毒机制提供理论依据。首先从DF-1细胞RNA,进行PCR扩增获得鸡TRIM62蛋白基因,并通过原核表达及蛋白纯化后获得TRIM62蛋白。分别将原核表达获得的TRIM62蛋白和慢病毒重组载体转染作用于REV感染的DF-1细胞;荧光定量PCR及Western Blot检测其抗REV复制效果;利用纯化TRIM62蛋白免疫新西兰大白兔,制备鸡TRIM62多克隆抗体,进一步进行免疫组化检测TRIM62在鸡各组织内的分布定位及动态表达变化;qRT-PCR的方法检测TRIM62在鸡各组织内的动态转录水平变化。结果显示,表达纯化的TRIM62蛋白条带单一;过表达的TRIM62可以明显抑制REV在DF-1细胞内的复制,其抑制效果与转染滴度密切相关;免疫组化结果表明TRIM62广泛分布于各组织器官并定位于细胞质中,TRIM62在组织中的表达与REV组织嗜性有关。本研究制备了特异性良好的TRIM62多克隆抗体,并明确了鸡TRIM62蛋白可以有效抑制REV的复制;TRIM62广泛分布于各组织器官并定位于细胞质中,TRIM62在组织中的表达与REV组织嗜性有关。本研究为后期TRIM62抗REV机制的研究奠定了基础。