【摘 要】
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辣椒(Capsicum annuum L.)是茄科辣椒属的一年或多年生草本植物,它富含维生素C、辣椒素,营养价值丰富。辣椒素是决定辣椒品质的重要性状,但是目前的研究表明,辣椒素的生物合
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辣椒(Capsicum annuum L.)是茄科辣椒属的一年或多年生草本植物,它富含维生素C、辣椒素,营养价值丰富。辣椒素是决定辣椒品质的重要性状,但是目前的研究表明,辣椒素的生物合成与环境、基因型和栽培条件有非常密切的关系,从而导致目前天然辣椒素远不能满足辣椒素的市场需求。所以纯天然、无污染、具有多种生物功能的辣椒素具有广阔的开发前景。2014年Qin和Kim完成了辣椒的基因组测序。在辣椒素生物合成途径中,酰基转移酶基因Pun1的表达量多少,对辣椒果实的辣味强弱起到了决定性作用。对Pun1基因调控的研究,为全面解析辣椒素生物合成途径调控机制,提高辣椒果实品质增加其商品价值起到了重要意义。本论文对辣椒MYB家族2个MYB转录因子基因进行了克隆测序、生物信息学分析、亚细胞定位及与Pun1基因互作的研究,结果如下:1.本研究通过PCR技术从辣椒中克隆出两个MYB家族转录因子的基因CaAJMYB和CaAFMYB。其中CaAJMYB全长1096bp,编码262个氨基酸,在转录因子氨基酸序列的14到61以及序列67到112分别存在一个MYB结构域,定位在细胞核中;CaAFMYB全长1128bp,编码340个氨基酸,在氨基酸序列的13到60以及66到109分别存在一个MYB结构域,定位在细胞壁中。R2R3-MYB转录因子,指的是包含了两个不同的MYB结构域的MYB转录因子,由此推断CaAFMYB和CaAJMYB转录因子属于R2R3-MYB亚族。2.通过PCR技术扩增得到酰基转移酶基因Pun1的启动子。其全长982bp,构建AD目标载体pLacZi-Pun1及BD报告载体pGAD424-AJMYB、pGAD424-AFMYB,利用酵母单杂交技术将载体转入酵母菌株YM4271,并通过显色反应验证出这两个转录因子与Pun1基因均产生互作,其中,CaAJMYB互作能力更强。
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