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目的:淋巴结转移是直肠癌最主要的转移途径之一,而跳跃转移是其重要特点。如果淋巴结清扫不合理,将会大大影响患者术后生存率。有研究显示,常规直肠癌根治术后,50%仍死于复发转移,常规病理检测淋巴结阴性的患者中,20%~30%在5年内死于转移或复发,说明这些患者存在常规方法不能检测出的微小残余病灶,即微转移灶。D3淋巴结常因跳跃转移产生微转移灶,而这些微转移的淋巴结即成为术后转移和复发的潜在因素。扩大淋巴清扫范围,尽量清除所有可能被侵犯的淋巴结能够明显降低局部复发率,提高术后生存率。直肠癌淋巴结转移已有较多的研究,但微转移的研究尚少,特别是D3站淋巴结微转移情况未见报道。因此,本研究旨在探索直肠癌D3淋巴结微转移的规律为直肠癌淋巴结的合理清扫提供客观依据。方法:第一部分:①将符合筛选标准的68例中低位进展期直肠癌患者依次入组,均接受腹腔镜下保留盆腔自主神经的直肠癌D3根治术;②将术中切取的淋巴组织用二甲苯-乙醇法清除脂肪组织,切片后进行HE染色,选出阴性淋巴结,再分别进行一抗为CK20和CDX2的免疫组化染色,均按切取部位记录阳性结果。③分析各站淋巴结转移和微转移情况。第二部分:①入组的68例患者均在术中切取癌组织、癌旁组织和正常组织(距肿瘤边缘>10cm)各一块;②将切取的癌组织、癌旁组织和正常组织切片后,与淋巴结切片一起进行一抗为VEGF-C的免疫组化染色。③分析VEGF-C的表达与各站淋巴结转移、微转移之间的关系。结果:①D3站各组所检出的676枚淋巴结中,常规HE染色发现D3站明确转移淋巴结共14枚,分别来自6例患者(占8.8%),一抗为CK20和CDX2的免疫组化染色检测发现D3站微转移淋巴结共41枚,分别来12例自患者(占17.6%),其中5例同时伴有明确转移,D3淋巴结总转移率为19.1%(13例)。②VEGF-C的表达与肿瘤分化程度、肿瘤分期以及淋巴结转移密切相关,而与性别、年龄等无关;VEGF-C的表达在直肠癌患者的正常组织、癌旁组织及癌组织中的表达差异显著,且呈明显递增趋势;癌组织中VEGF-C的表达在无淋巴结转移组与D1淋巴结转移组之间差异非常显著,而在D1、D2、D3淋巴结转移组之间的表达并无明显差异。③明确转移的淋巴结中VEGF-C表达明显高于癌组织中的表达,D3微转移淋巴结和正常淋巴结中的表达低于癌组织,而两者之间却无差异。结论:①中低位进展期直肠癌D3淋巴结明确转移率为8.8%,微转移率为17.6%,总转移率为19.1%。②D3淋巴结转移可以是与系膜淋巴结转移同时发生的事件,也可以是系膜淋巴结转移后继发的事件,因此,中低位进展期直肠癌是否已有系膜淋巴结转移,都可能同时伴有D3站淋巴结转移或微转移。③中低位进展期直肠癌发生D3淋巴结转移的几率较大,而目前尚无法在术前或术中判断D3站淋巴结是否已有转移情况,因此,对中低位进展期直肠癌患者尽量行D3淋巴结清扫意义较大。