背景:绝经后骨质疏松症(PMOP)是由更年期后女性机体雌激素水平下降引起,现阶段临床防治手段多使用外源性补充雌激素,但是该替代疗法可能产生诸如乳腺癌,子宫内膜癌的等恶性肿瘤毒副作用。而植物雌激素作为安全的雌激素替代物防治PMOP正逐渐受到关注。我国膳食摄取植物雌激素量虽然显著高于西方欧美人口,但是PMOP发病率并未明显降低。我们认为这可能涉及遗传因素。本课题组前期研究已经发现绝境后妇女ERα基因多态性与膳食中植物雌激素摄入的骨密度效应有关,且细胞研究发现植物雌激素对ERβ亲和力显著高于ERα,但是ERβ基因多态性是否与膳食植物雌激素摄入的骨密度效应有关并未见关报道。目的:本研究拟从流行病学水平探讨ERβ基因多态性与膳食植物雌激素骨密度调节效应的关系。方法:对选取符合调查要求的300名南昌市绝经后妇女,用PCR-RFLP技术检测ERβ基因Rsa I和Alu I限制性酶切位点基因多态性;根据调查数据比较ERβ不同基因型时骨密度差异,并分析不同基因型时植物雌激素摄入量与不同部位BMD骨密度关系。结果:在比较各基因型样本间一般情况与各部位骨密度发现,在校正体重指数、年龄、绝经时间后,RR基因型L4的BMD高于Rr、rr组(P<0.05),L2,L3髋骨总体及股骨颈、大转子、ward三角在各摄入量组内无统计学差异。将各基因型样本依据膳食植物雌激素摄入量三分位数分组后进一步分析发现,在校正体重指数、年龄、绝经时间后,Alu I,Rsa I基因型样本植物雌激素摄入量与低中高三组不同骨组织的骨密度比较,差别均无统计学意义。结论:1.ERβ基因Rsa I位点的RR基因型样本L4 BMD高于Rr,rr组,其余部位BMD在个基因型组间无显著性差异。2.ERβ基因Alu I位点多态性与BMD无关。3.在ERβ基因Rsa I,Alu I位点的各基因型样本中,各部位与膳食植物雌激素摄入量无关。目的:本课题组流行病学研究显示ERα而非ERβ基因多态性影响膳食植物雌激素与BMD关联性,现有报道认为植物雌激素的生物学效应主要通过作用于ERβ,这与我们的结果相矛盾。本研究拟从细胞水平观察植物雌激素代表药金雀异黄酮(genestein,GEN)对成骨细胞和破骨细胞效应是否由ERα、ERβ所介导,从而为流行病学研究结果提供依据。。方法:体外诱导培养小鼠前成骨细胞MC3T3-E1分别给予各组细胞10-9-10-7mol/l的GEN,以及ERα阻断剂MPP,ERβ阻断剂PHTPP处理。成骨细胞骨形成效应,通过碱性磷酸酶(ALP)染色法进行观察;并通过矿化结节茜素红染色再次验证同时体外诱导培养小鼠单核/巨噬细胞系RAW264.7细胞分化为破骨细胞,分别给予10-9-10-7mol/l GEN,以及ERα阻断剂MPP,ERβ阻断剂PHTPP处理。通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色实验与骨吸收陷窝实验观察破骨细胞的骨吸收效应。结果:ALP染色结果显示,与对照组相比,不同浓度的GEN可增加成功细胞的生成,差异有统计学意义(p<0.01)。在加入MPP,PHTPP后,可取消GEN的这种效应(p<0.05)。矿化结节染色实验结果与ALP染色实验类似。破骨细胞实验方面,TRAP染色试验中,加入不同浓度的GEN均能减少成熟破骨细胞的生成(p<0.01),且呈浓度依赖性,加入MPP后可逆转GEN的破骨细胞抑制效应。骨吸收陷窝实验结果显示与对照组相比,加入不同浓度的GEN均可减少骨吸收陷窝面积,且呈浓度依赖性。而这一效应可以被MPP而非PHTPP所逆转。结论:1.金雀异黄酮(GEN)的促MC3T3-E1骨形成效应是由ERα、ERβ所共同介导。2.金雀异黄酮(GEN)的抗RAW264.7分化为破骨细胞是主要由ERα介导,其对RAW264.7分化破骨细胞的骨吸收陷窝抑制效应由ERα而非ERβ所介导。