研究背景:动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是一种以大中动脉内壁脂质沉积为特点的慢性炎症性疾病。AS的发病机制复杂,病程缓慢,并且疾病的不断进展往往会引发冠心病、脑梗死、外周血管病等一系列心血管事件,严重影响人类健康。AS的发展过程涉及脂质代谢紊乱及炎症的发生发展,脂质代谢异常会引起巨噬细胞泡沫化,而免疫平衡的破坏则会对巨噬细胞的极化状态产生影响,加快AS进程。调控巨噬细胞泡沫化及极化状态对于控制AS的发生发展具有重要价值。冠心平(Guanxinpingprescription,GXP)是江苏省中医院创制的院内制剂,在临床使用己有十余载,疗效确切。其主治功能为冠心病中的稳定型心绞痛、急性心肌梗死的辅助治疗,并且对AS治疗效果显著,但其对AS的作用机制目前尚未明确。研究目的:本研究拟在观察冠心平含药血清对体外培养的RAW264.7巨噬细胞泡沫化的影响,及对巨噬细胞极化状态的作用,探讨调节巨噬细胞泡沫化及极化是否为冠心平改善AS的一个潜在机制。研究方法:SD大鼠给予低(0.405 g/kg)、中(0.810g/kg)、高(1.620 g/kg)剂量冠心平,连续灌胃给药4天,获取冠心平含药血清。体外培养小鼠RAW264.7巨噬细胞系,选用氧化低密度脂蛋白(Oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)构建巨噬细胞泡沫化模型,药物处理组给以不同剂量含药血清,油红O染色法观察巨噬细胞泡沫化情况;酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定细胞游离胆固醇(Free cholesterol,FC)、胆固醇酯(Cholesteryl ester,CE)表达水平;实时荧光定量 PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测细胞清道夫受体A(Scavenger receptor-A,SR-A)及CD36表达水平。脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导巨噬细胞M1型极化模型,冠心平含药血清处理细胞,ELISA检测细胞上清M1/M2巨噬细胞特征性细胞因子TNF-α/TGF-β1的分泌水平;流式细胞术检测M1/M2型巨噬细胞特征性表面分子CD86/CD206表达水平;qRT-PCR法检测CD86/CD206 mRNA表达水平。研究结果:冠心平含药血清可以减轻体外巨噬细胞泡沫化程度;调节细胞FC、CE表达水平;减少SR-A及CD36 mRNA表达水平。冠心平含药血清对细胞上清中TNF-α表达无显著影响,显著增加TGF-β1分泌;减少M1型巨噬细胞极化而增加M2型巨噬细胞比例;降低CD86 mRNA表达而增加CD206的表达。结论与意义:冠心平含药血清抑制ox-LDL诱导的RAW264.7巨噬细胞泡沫化,抑制LPS诱导的巨噬细胞M1型极化。本项研究证实了冠心平含药血清能够抑制巨噬细胞的泡沫化和极化,减轻巨噬细胞炎性状态,这可能是冠心平治疗AS的潜在机制,为深入研究冠心平治疗心血管疾病的机制提供进一步了实验依据。