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目的:本实验通过检测NPR-A、p38MAPK及细胞骨架Tubulin-ɑ蛋白质及mRNA在胃癌及正常胃粘膜组织中表达水平,并分析其与临床病理特征之间的关系,以及在胃癌组织中NPR-A、P38MAPK和细胞骨架Tubulin-a的相关关系,为胃癌的发病机制的研究提供新的思路及为靶向治疗提供潜在的药物作用靶点。方法:收集承德医学院附属医院2016年9月至2017年9月手术切除的胃癌组织41例,正常胃粘膜组织41例(距癌旁边缘10cm以上认为正常胃组织),其中男性27例,女性14例,年龄38~85岁,肿瘤高中分化17例、低分化有24例,TNM分期为Ⅰ&Ⅱ期19例、Ⅲ&Ⅳ期22例,伴有淋巴结转移20例、无淋巴结转移21例,伴有浆膜浸润34例、无浆膜浸润7例。所有病例术前均未行化疗、放疗,经术后病理学检查证实为胃腺癌。应用SP免疫组织化学技术和Western Blotting技术检测胃癌组织和正常胃组织中NPR-A、P38MAPK和细胞骨架Tubulin-ɑ蛋白的表达情况,应用QRT-PCR技术检测胃癌组织和正常胃组织中NPR-A、P38MAPK和细胞骨架Tubulin-ɑmRNA的表达情况,采用Pearson相关性分析对计量资料进行相关分析,以P<0.05为差异有统计学意义。结果:1免疫组化(IHC)实验结果1.1 NPR-A、P38MAPK和细胞骨架Tubulin-ɑ蛋白在胃癌和正常胃粘膜组织中的表达情况P38MAPK和细胞骨架Tubulin-ɑ在胃癌中表达量高于正常胃粘膜组织(P=0.03,P=0.04);NPR-A在胃癌中表达量低于正常胃粘膜组织(P<0.01)。1.2 NPR-A、P38MAPK和细胞骨架Tubulin-ɑ蛋白的表达与胃癌临床病理指标之间的关系NPR-A、P38MAPK和细胞骨架Tubulin-ɑ的表达均与患者的年龄、性别因素无关(P>0.05),P38MAPK和细胞骨架Tubulin-ɑ与分化程度无关(P>0.05)。NPR-A在低分化,侵及浆膜层,有淋巴结转移,TNM分期为Ⅲ&Ⅳ期的胃癌组织中的阳性表达低于高中分化,未侵及浆膜层,无淋巴结转移,TNM分期为Ⅰ&Ⅱ期的胃癌组织(P<0.05)。P38MAPK在有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ&Ⅳ期的胃癌组织中的阳性表达低于无淋巴结转移、TNM分期为Ⅰ&Ⅱ期的胃癌组织(P<0.05)。细胞骨架Tubulin-ɑ在侵及浆膜层,有淋巴结转移,TNM分期为Ⅲ&Ⅳ期的胃癌组织中的阳性表达高于未侵及浆膜层,无淋巴结转移,TNM分期为Ⅰ&Ⅱ期的胃癌组织(P<0.05)。2蛋白印迹(Western Blotting)实验结果2.1 NPR-A、P38MAPK和细胞骨架Tubulin-a蛋白在胃癌和正常胃粘膜组织中的表达情况P38MAPK和细胞骨架Tubulin-a在胃癌中表达量高于正常胃粘膜组织(P<0.01);NPR-A在胃癌中表达量低于正常胃粘膜组织(P<0.01)。2.2 NPR-A、P38MAPK和细胞骨架Tubulin-a蛋白的表达与胃癌临床病理指标之间的关系NPR-A、P38MAPK和细胞骨架Tubulin-a的表达均与患者的年龄、性别因素无关(P>0.05),P38MAPK和细胞骨架Tubulin-a与分化程度无关(P>0.05)。NPR-A在低分化,侵及浆膜层,有淋巴结转移,TNM分期为Ⅲ&Ⅳ期的胃癌组织中的阳性表达低于高中分化,未侵及浆膜层、无淋巴结转移、TNM分期为Ⅰ&Ⅱ期的胃癌组织(P<0.05)。P38MAPK在侵及浆膜层,有淋巴结转移,TNM分期为Ⅲ&Ⅳ期的胃癌组织中的阳性表达低于未侵及浆膜层,无淋巴结转移,TNM分期为Ⅰ&Ⅱ期的胃癌组织(P<0.05)。细胞骨架Tubulin-ɑ在侵及浆膜层,有淋巴结转移,TNM分期为Ⅲ&Ⅳ期的胃癌组织中的阳性表达高于未侵及浆膜层,无淋巴结转移,TNM分期为Ⅰ&Ⅱ期的胃癌组织(P<0.05)。3实时荧光定量(QRT-PCR)实验结果3.1 NPR-A、P38MAPK和细胞骨架Tubulin-ɑmRNA在胃癌和正常胃粘膜组织中的表达情况P38MAPK和细胞骨架Tubulin-ɑ在胃癌mRNA中表达量高于正常胃粘膜组织(P<0.01);NPR-A在胃癌中表达量低于正常胃粘膜组织(P<0.01)。3.2 NPR-A、P38MAPK和细胞骨架Tubulin-a mRNA的表达与胃癌临床病理指标之间的关系NPR-A、P38MAPK和细胞骨架Tubulin-ɑmRNA的表达均与患者的年龄、性别因素无关(P>0.05),P38MAPK和细胞骨架Tubulin-ɑ与分化程度无关(P>0.05)。NPR-A在低分化,侵及浆膜层,有淋巴结转移,TNM分期为Ⅲ&Ⅳ期的胃癌组织中mRNA的表达低于高中分化,未侵及浆膜层,无淋巴结转移,TNM分期为Ⅰ&Ⅱ期的胃癌组织(P<0.05)。P38MAPK、细胞骨架Tubulin-ɑ在侵及浆膜层、有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ&Ⅳ期的胃癌组织中的mRNA表达高于未侵及浆膜层,无淋巴结转移,TNM分期为Ⅰ&Ⅱ期的胃癌组织(P<0.05)。4胃癌组织中NPR-A、P38MAPK和细胞骨架Tubulin-ɑ的相关关系胃癌组织中NPR-A蛋白质的表达量与P38MAPK的表达呈正相关(r=0.393,P<0.05),与细胞骨架Tubulin-ɑ的表达呈负相关(r=-0.351,P<0.05),P38MAPK蛋白质的表达量与Tubulin-ɑ的表达呈负相关(r=-0.047,P<0.01);胃癌组织中NPR-A mRNA的表达量与P38MAPK、细胞骨架Tubulin-a的表达量均呈负相关(r=-0.581,P<0.05;r=-0.579,P<0.05)P38MAPK mRNA的表达量与Tubulin-ɑ的表达呈正相关(r=0.833,P<0.01)。结论:1.胃癌组织中NPR-A的蛋白表达水平低于正常胃粘膜组织,胃癌组织中P38MAPK和细胞骨架Tubulin-ɑ的蛋白表达水平明显高于正常胃粘膜组织,且NPR-A与P38MAPK协同抑制细胞骨架Tubulin-ɑ的改变。2.胃癌组织中NPR-A在基因水平上通过抑制P38MAPK mRNA的改变促进Tubulin-ɑmRNA的改变。3.NPR-A可通过调节P38MAPK信号通路的改变进而影响细胞骨架Tubulin-ɑ的改变,因此NPR-A可作为胃癌的靶向治疗的潜在药物作用靶点,为胃癌的发病机制提供了新的思路。